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蒂科(上海)生物科技有限公司

AU565細胞,AU565細胞株的復蘇方法

時間:2017-2-9閱讀:1415

AU565細胞,AU565細胞株的復蘇方法

產品名稱:AU565細胞

貨號:AU565

規格:1~3*106細胞/25cm2培養瓶

上海蒂科生物 細胞株、血清、培養基、 各種細胞培養相關試劑,開學酬賓*中,更多產品,更大優惠,敬請!!

 

一、細胞復蘇的原則

在實際操作中,凍存細胞要進行復蘇,再培養傳代。復蘇細胞一般采用快速融化法。以保證細胞外結晶快速融化,以避免慢速融化水分滲入細胞內,再次形成胞內結晶損傷細胞。

二、細胞復蘇的主要操作步驟

(1)佩戴眼鏡和手套,從液氮罐中取出安瓿或冷凍管。

(2)迅速放入 38℃水浴中,并不時搖動,在1分鐘內使其*融化,然后在無菌下取出細胞。

(3)在1000r/min速度下離心5~10分鐘,棄去上層液,加入適量培養液后接種于培養瓶中,接種濃度1×109/L,置37℃溫箱靜置培養,次日更換一次培養液,繼續培養,觀察生長情況。若細胞密度較高,及時傳代。或無需離心直接將細胞加入瓶中,并加入培養基貼壁培養12~24小時后,充去上清,換入新鮮培養基繼續培養。

三、注意事項

在細胞復蘇操作時,應注意融化凍存細胞速度要快,可不時搖動安瓿或冷凍管,使之盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。這樣復蘇的凍存細胞存活率高,生長及形態良好。然而,由于凍存的細胞還受其他因素的影響,有時也會有部分細胞死亡。此時,可將不貼壁、飄浮在培養液上(已死亡)的細胞輕輕倒掉,再補以適量的新培養液,也會獲得較為滿意的結果。

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