激光共焦顯微鏡的背景和原理

閱讀：552發布時間：2023-8-15

　　一、激光共焦顯微鏡是一種用于材料科學領域的分析儀器，可實現最多500幅圖像自動拼圖，水平分辨率12μm，z軸分辨率0.01μm。測量亞微米級的線寬、線與面的粗糙度，透明膜厚等數據，原位觀察和獲取材料表面形貌，三維輪廓。

　　二、發展背景：

　　(1)在傳統光學顯微鏡基礎上，激光掃描共聚焦顯微鏡用激光作為光源，采用共軛聚焦原理和裝置，并利用計算機對所觀察的對象進行數字圖像處理觀察、分析和輸出。其特點是可以對樣品進行斷層掃描和成像，進行無損傷觀察和分析細胞的三維空間結構。

　　(2)同時，利用免疫熒光標記和離子熒光標記探針，該技術不僅可觀察固定的細胞、組織切片,還可以對活細胞的結構、分子、離子及生命活動進行實時動態觀察和檢測，在亞細胞水平上觀察諸如Ca2+，pH值，膜電位等生理信號及細胞形態的變化，成為形態學、分子細胞生物學、神經科學、藥理學、遺傳學等領域中新一代強有力的研究工具，極大地豐富了人們對細胞生命現象的認識。

　　三、原理：組織樣品中如果有可被激發的熒光物質，受到激發后發出的熒光經原來入射光路直接反向回到分光鏡，通過探測針孔時先聚焦，聚焦后的光被光電倍增管(PMT)探測收集，并將信號輸送到計算機，處理后在計算機顯示器上顯示圖像。

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