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316次細胞蓋片標本的制作實驗步驟
(1)取材:將生長在蓋玻片或聚苯乙烯蓋片上的單層細胞取出,置青霉素瓶內,用4℃PBS緩沖液漂洗3次。2%冷的戊二醛固定30min,冷PBS緩沖液漂洗3次。
(2)固定:1%鋨酸固定30min。PBS緩沖液漂洗3min或過夜。
(3)脫水、滲透同操作方法(1)。
(4)包埋與聚合:將明膠囊裝滿混合包埋劑,倒蓋在單層細胞上,60℃固化2h。
(5)分離蓋片與包埋劑:聚苯乙烯蓋片與包埋劑直接用手分離,而玻璃蓋片與包埋劑一起放人盛液氮燒杯內片刻,迅速取出放人自來水中,二者即可分離。觀察。
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