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*、腫瘤耐藥細胞株的生長情況
胚胎干細胞性很高,可以分化成各種細胞,細胞株能夠傳到40-50代,但遺傳物質沒有發生改變。而細胞系是細胞傳至50代以后生存下來,細胞的遺傳物質發生了改變,并且帶有癌變的特點。有可能在培養條件下無限增殖。安全性:所有腫瘤和病毒轉染的細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細胞后,在倒置鏡下觀察整個細胞生長情況。
1.如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶,吸出培養液,換 10ml新鮮培養液后繼續培養。
2.如果細胞已長滿,即可進行傳代培養。
第二、腫瘤耐藥細胞株的具體步驟如下:
1. 棄去培養液,用PBS洗1-2次。
2. 加1ml消化液于培養瓶中,倒放于37℃培養箱1-3分鐘預熱,之后翻轉培養瓶10-30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若干細胞大部分變圓,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量*培養基終止消化。
第三、腫瘤耐藥細胞株的注意事項:
1.觀察細胞在低倍鏡下進行,否則不能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態請在10X或20X物鏡下。
2.瓶中運輸培養基不能重復再用,請換用加雙抗的新培養基,細胞凍存后,培養基中可不加任何抗生素。
3.有些干細胞貼壁不牢,如發現貼壁細胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶內。
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