干細(xì)胞通常對PH和溫度變化較為敏感。讓細(xì)胞在每個階段都至少有一個適應(yīng)過渡期。
細(xì)胞存活率和細(xì)胞密度
細(xì)胞在對數(shù)生長期中期快速分裂，且在適應(yīng)過程開始時，存活率大于90%。這一點至關(guān)重要。當(dāng)細(xì)胞需傳代時，建議采用1:2或1:3的小傳代比例，以維持更高的細(xì)胞密度，同時提供隔絕期間可能有助于細(xì)胞的細(xì)胞生長因子。當(dāng)細(xì)胞適應(yīng)新的培養(yǎng)條件時，在增大細(xì)胞傳代密度。
細(xì)胞生長
如果在適應(yīng)過程中，細(xì)胞停止了生長，則需讓細(xì)胞有更多的時間來適應(yīng)培養(yǎng)基組合。例如，在方法1的階段4，向無血清培養(yǎng)基添加少量的血清(1-3%)。這樣有助于細(xì)胞更容易地適應(yīng)新的培養(yǎng)基。然后，在幾個過渡期內(nèi)，緩慢地減少血清量，直至學(xué)清量為0。
懸浮培養(yǎng)物
Meiatech公司的無血清培養(yǎng)基和無蛋白培養(yǎng)基不含血清中所發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞附著延伸影子。在一段過渡期內(nèi)，貼壁細(xì)胞將開始離開表面，并成為懸浮細(xì)胞系開始生長。細(xì)胞也可能因適應(yīng)而發(fā)生形態(tài)變化。監(jiān)測細(xì)胞的生長速度，只要細(xì)胞能夠與新系統(tǒng)相融合，任何形態(tài)變化都不重要。
細(xì)胞叢
在適應(yīng)于無血清培養(yǎng)期間，細(xì)胞容易形成叢。傳代培養(yǎng)時，將叢輕輕折斷，使其分散開。將培養(yǎng)物從靜止細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)轉(zhuǎn)移到可旋轉(zhuǎn)錐形瓶內(nèi)，這樣可能會有助于防止細(xì)胞叢的形成。
抗生素
由于血清蛋白易于粘合到抗生素上，因此，不建議在無血清適應(yīng)過程中使用抗生素。如不存在血清蛋白，則抗生素水平可能會對細(xì)胞產(chǎn)生毒性。
預(yù)防措施
確保在開始適應(yīng)過程前，儲存有大量原培養(yǎng)基的細(xì)胞。如果干細(xì)胞沒有存活到下一階段，則在整個過程中保存每一階段使用的培養(yǎng)瓶。
乙酰哈巴苷    20mg    供含量測定    111925-201001
醋酸甲羥孕酮    100mg    含量測定    100001-200504
安乃近    500mg    含量測定    100002-200605
（+）2-氨基丁醇    100mg    含量測定    100003-200703
苯丙酸諾龍    100mg    含量測定    100004-200603
苯丁酸氮芥    50mg    含量測定    100005－199402
苯甲酸雌二醇    100mg    含量測定    100006-200504
芐氟噻嗪    100mg    含量測定    100007-200703
干細(xì)胞