我司全程提供細胞生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存細胞株說明書信息，我們專業(yè)您的細胞系實驗，讓您實驗再無煩擾！產(chǎn)品僅用于科研

名稱    L Wnt-3A (小鼠皮下結(jié)締組織細胞) (種屬鑒定正確)
別稱 L-Wnt-3A; L-Wnt3A; LWnt3A; LWnt-3A

種屬 小鼠

年齡（性別） 雄性，100日齡

組織來源 組織：皮下結(jié)締組織；疏松結(jié)締組織及脂肪；品系：C3H/An

生長特性 貼壁細胞

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

背景描述 L Wnt-3A細胞是由L-M(TK-)細胞用Wnt-3A表達載體轉(zhuǎn)染并在含G418的培養(yǎng)基中篩選出的穩(wěn)轉(zhuǎn)株。Wnt-3A基因編碼一個有變異的信號功效分泌性糖蛋白，Wnt基因控制胚胎發(fā)過程中的許多模式形成和生長事件。L Wnt-3A細胞分泌有生物活性的Wnt-3A蛋白，L Wnt-3A細胞是目前Wnt-3A條件培養(yǎng)基的最好來源。由于這種條件培養(yǎng)基還包含Wnt-3A蛋白外的其他因子，對于涉及Wnt-3A條件培養(yǎng)基的實驗有必要用其來源細胞株作對照。

生物安全等級 1

生長培養(yǎng)基 DMEM＋0.4mg/ml G418＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

基因表達情況 Wnt-3A

保藏機構(gòu) ATCC; CRL-2647
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備。

使用方法：
收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
大提柱式動物 DNAout4次  一站式乙酸 - 尿素 PAGE 電泳套裝30 次

百萬堿基級動物 DNAout10 次  一站式全血 mRNAout25 次

柱式軟體動物 DNAout50 次  一站式平末端克隆試劑盒20 次

柱式昆蟲 DNAout50 次  一站式動物 mRNAout25 次

血液 DNAout50 次  一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( 中 pH)30 次
大鼠CDP-甘油二酯--甘油-3-磷酸3磷脂酰轉(zhuǎn)移酶,線粒體(PGS1)elisa分析檢測試劑盒

大鼠CDCP1 elisa分析檢測試劑盒

大鼠CD8分子(CD8)elisa分析檢測試劑盒

大鼠CD68分子(CD68)elisa分析檢測試劑盒

大鼠CD63分子(CD63)elisa分析檢測試劑盒
L Wnt-3A (小鼠皮下結(jié)締組織細胞)大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI1)elisa檢測試劑盒

大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)elisa檢測試劑盒

大鼠纖溶酶原激活物抑制因子2(PAI2)elisa檢測試劑盒

大鼠纖溶抑制因子(TAFI)elisa檢測試劑盒

大鼠纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)elisa檢測試劑盒
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。