蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

產品名稱：神經元特異性烯醇化酶(NSE)重組蛋白小鼠

英文名稱：Recombinant Enolase, Neuron Specific (NSE)

ENO2; Enolase 2; Gamma Enolase; 2-phospho-D-glycerate hydro-lyase; Neural enolase

型號：GOY-01D217

酶與激酶

腫瘤免疫

感染免疫

神經科學

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：n/a

預測分子量：36.1kDa

實際分子量：37kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Met1~Ser104 linked with Leu224~Leu434 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點：5.2

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

英文名稱：Recombinant Lactoperoxidase (LPO)  產品名稱：乳過氧化物酶(LPO)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Peroxiredoxin 2 (PRDX2)  產品名稱：過氧化還原酶2(PRDX2)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Ubiquitin Carboxyl Terminal Hydrolase L5 (UCHL5)  產品名稱：泛素羧基端酯酶L5(UCHL5)重組蛋白物種：Bos taurus; Bovine (Cattle，牛)

英文名稱：Recombinant Fatty Acid Synthase (FASN)  產品名稱：脂肪酸合酶(FASN)重組蛋白物種：Chicken (Gallus，雞)

英文名稱：Recombinant Dihydrolipoyl Transacetylase (DLAT)  產品名稱：二氫轉乙?；?DLAT)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Interleukin 1 Receptor Associated Kinase 2 (IRAK2)  產品名稱：白介素1受體關聯激酶2(IRAK2)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

磷酸化鈣調節素抗體 phospho-CaM I (Ser 102)

12號染色體開放閱讀框54抗體 C12ORF54

細胞分裂相關蛋白CSTF64抗體 CstF-64

磷酸化細胞分裂相關蛋白CSTF64抗體 phospho-CstF64 (Ser83)

磷酸化細胞分裂相關蛋白CSTF64抗體 phospho-CstF64(Ser498)

CD3抗體 CD3E

CD4抗體 CD4

白細胞共同抗原抗體 CD45

白細胞共同抗原抗體 CD45

間隙連接蛋白36抗體 Connexin-36

白細胞共同抗原抗體 CD45

12號染色體開放閱讀框61抗體 C12ORF61

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RGC-5, 小鼠視網膜神經節細胞HKC(人胚腎上皮細胞)

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

ARPE-19(人視網膜上皮細胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

蘇云金芽孢桿菌肯尼亞亞種 Bacillus thuringiensis subsp. Kenyae鼠傷 Salmonella typhimurium

小鼠骨髓瘤淋巴細胞苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

MGC80-3（MGC-803）人胃細胞大麗輪枝菌 Verticillium dahliea Kleb

小鼠支氣管成纖維細胞培養基大鼠成肌細胞

植物桿菌 Lactobacillus plantarumHGC-27人胃細胞