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SV40轉染人成骨細胞;hFOB 1.19說明書現貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應各種細胞株,細胞系,種類齊全,現貨,質量保證,公司所有產品僅供科研使用,不得用于醫學診斷。使用前仔細閱讀本說明書。
產品名稱 | SV40轉染人成骨細胞;hFOB 1.19說明書 |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長期保存 |
細胞名稱 SV40轉染人成骨細胞;hFOB 1.19說明書
形態特性
生長特性 貼壁生長
特征特性 在0.6mg/ml新霉素G418存在下,用溫度敏感的表達載體pUCSVisA58轉染自然流產的胎兒四肢組織,建立了此細胞系。 在許可溫度33.5oC下細胞分裂很快,而在限制溫度39.5oC下細胞極少分裂或不分裂。 這些細胞具有分化為表達造骨細胞表型的成熟造骨細胞的能力。 這些細胞提供了一個同質化的快速增殖模型系統,用于研究正常人造骨細胞的分化,造骨細胞生理和激素,生長因子,和對造骨細胞的功能及分化有影響的細胞因子。
培養條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 優質胎牛血清,10%;0.3mg/ml G418
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
SV40轉染人成骨細胞;hFOB 1.19說明書運輸保存:
采用干冰保存運輸。收到細胞時,若干冰已經*融化,請立即將細胞復蘇培養;若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研。
儲存:液氮。
運輸:干冰(第二代培養末期液氮凍存)。
細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。
注意:*次植入后,在6-16小時內更換培養基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞。到達客戶手中,出現任何問題(人為或者非人為),導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對于細胞的真實性,支持客戶檢測對應的biomarker,(如證明細胞錯誤,全額退款。)公司針對每株細胞,鑒定gene background,鑒定完成的細胞可以提供數據,用于證明細胞的真實性,并且幫助客戶更多的了解細胞特性。
SV40轉染人成骨細胞;hFOB 1.19說明書操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。130863-10 碘化丙啶干粉 10mg
CAS25535-16-4 碘化丙啶苯 10mg
CAS144-48-9 碘代乙酰胺 5g
131234-1 地塞米松溶液 ,50mg/mL 1mL
CAS50-02-2 地塞米松 100mg
90211-50 低載量 PCR 片段純化試劑盒 50 次
90211-100 低載量 PCR 片段純化試劑盒 100 次
130835-2.5 低熔點瓊脂糖 2.5g
130835-5 低熔點瓊脂糖 5g
100830-30 低 pH 緩沖液套裝 30 次
CAS9001-53-0 等離子體胺氧化酶 600U
CAS11028-71-0 刀豆球蛋白 A Ⅲ 50mg
CAS11028-71-0 刀豆蛋白 A IV 25mg
P001-1 蛋白質分析技術服務 1 個樣
70102C-10 蛋白質電泳分子量標準 (43.0-200.0KD) 10 次
70102A-15 蛋白質電泳分子量標準 (3.3-20.1KD) 15 次
70102B-20 蛋白質電泳分子量標準 (14.4-97.4KD) 20 次
P004-1 蛋白質表達與純化技術服務 一個蛋白
131121-100 蛋白折疊試劑盒 100 次
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