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當前位置:上海研生實業有限公司>>細胞>>轉化細胞>> hFOB 1.19*

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更新時間:2017-01-10 14:36:54瀏覽次數:779次

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hFOB 1.19*冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽長期儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。

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冷凍保存方法一:冷凍管置于4300分鐘→(-2030分鐘*)→-8016~18小時(或隔夜)→液氮槽長期儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
hFOB 1.19*操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
hFOB 1.19*注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養箱內靜置培養,隔天再取出觀察。此時多數細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養;如果染色結果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認后我們為您再免費寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用,細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養基混合,使細胞逐漸適應培養條件。
5. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和公司技術部溝通交流。
6. 該細胞只能用于科研,不得用于臨床應用。

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hFOB 1.19*郎比可假絲酵母   產生AB  /

酪丁酸梭菌   產生葡萄糖苷酶,產延胡索酸  /

類干酪乳桿菌類干酪亞種     /

類紅紅細菌   培養基測試,腸道研究,新興傳染病研究  /

資源名稱 hFOB 1.19*
種屬  SV40轉染成骨細胞

類型  骨;成骨細胞;以SV40巨細胞抗原轉染

形態  ***

培養方法 

培養基  D-MEM/F-12培養基(GIBCO,貨號12400024,添加L-glutamine 150mg/L, NaHCO3 1.5g/L)90%0.3mg/ml G418;優質胎牛血清,10% 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5% 溫度:33.5攝氏度。

生長特性  貼壁生長

詳細說明 

動物種別 

描述  0.6mg/ml新霉素G418存在下,用溫度敏感的表達載體pUCSVisA58轉染自然流產的胎兒四肢組織,建立了此細胞系。 在許可溫度33.5oC下細胞分裂很快,而在限制溫度39.5oC下細胞極少分裂或不分裂。 這些細胞具有分化為表達造骨細胞表型的成熟造骨細胞的能力。 這些細胞提供了一個同質化的快速增殖模型系統,用于研究正常人造骨細胞的分化,造骨細胞生理和激素,生長因子,和對造骨細胞的功能及分化有影響的細胞因子。 在本庫通過支原體檢測。 在本庫通過STR檢測。

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