胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中常用*的添加培養(yǎng)基。它營(yíng)養(yǎng)豐富，大約含有三四百種不同成分，具有基礎(chǔ)培養(yǎng)基所不具備的營(yíng)養(yǎng)因子。本文締一生物為您分析如何融化胎牛血清讓實(shí)驗(yàn)更好的完成。
做細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)經(jīng)常會(huì)對(duì)血清凍融，怎么才能有效正確的利用血清也有對(duì)應(yīng)的方法，今天分析如何融化血清讓實(shí)驗(yàn)更好的完成。
與4℃過(guò)夜法相比,三步法為什么對(duì)血清更好呢？重點(diǎn)有二！
其一：關(guān)系到沉淀出現(xiàn)的幾率！
記得嗎？血清在融化過(guò)程中，瓶子里冰塊的底部你會(huì)看見(jiàn)亮亮的蛋白絲在下沉，如同蜂蜜溶于水時(shí)的亮線(xiàn)，這就是血清中大量的蛋白在快速融化，而水的熔點(diǎn)高于蛋白，融化的速度是比蛋白慢的。（回想一下高級(jí)冰淇淋和大棒冰的區(qū)別，你懂得！）試想，如果采用4℃過(guò)夜的方法，1瓶500毫升的血清融化好，大約需要10小時(shí)左右，蛋白先融化，沉降在瓶子的底部，水融化的速度比蛋白慢，于是造成大量蛋白溶于少量的水，此時(shí)就很容易有一些蛋白飽和析出，（大多是脂蛋白和纖連蛋白），這就是血清融化中產(chǎn)生沉淀的重要原因之一。
采用三步法，只要2.5個(gè)小時(shí)，溫和有效地加快了水融化的速度，另一方面，融化過(guò)程中可以間斷輕輕搖擺瓶子，讓蛋白在瓶中混勻。此方法不但節(jié)約了時(shí)間，而且大限度減少了血清沉淀出現(xiàn)的幾率。
血清融化過(guò)程中，蛋白質(zhì)會(huì)比水先融化。冰塊底部亮亮的細(xì)絲就是融化中的蛋白
其二：血清在培養(yǎng)細(xì)胞中，重要的是利用它的活性的因子，因此，融化過(guò)程中大限度地保留因子的活性，就變得非常重要。回憶一下，細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)，要保持細(xì)胞的活性，我們是要遵循“快融”原則還是“慢融”原則呢？快融！血清同樣如此！三步法需要兩個(gè)半小時(shí)，4℃過(guò)夜需要大約10個(gè)小時(shí)（冰箱一般設(shè)2-8℃，所以各實(shí)驗(yàn)室融化時(shí)間會(huì)稍有出入）。哪個(gè)速度對(duì)保留活性更好？不言而喻！
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