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2025/02/13
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細胞實驗中支原體污染是較為麻煩的問題，困擾著很多科研人。今天跟大家分享的是實驗室支原體檢測方法。
培養法：使用支原體肉湯培養基接種待測樣品（細胞培養上清等），經過約7-21天的培養，觀察有無支原體的生長，以此來判斷細胞培養基中有無支原體存在。該方法雖然經濟可靠，但實驗周期較長，所以常用來進行對懷疑細胞的最后甄別。
熒光指示細胞法：該方法較為快捷，方法簡單，但其靈敏度有一定的欠缺，易造成漏檢。
PCR法：PCR 法檢測支原體的方法最為快速、靈敏、取樣量少，既可做細胞本身，也可做細胞上清的檢測，同時可以檢測多種支原體的污染，是目前常用的檢測手段。但其成本較高，條件要求嚴格，且有時易出現假陽性或假陰性。彌補的方法是對懷疑的樣品要經過3 次PCR 檢測，或用培養法檢測。
DNA染色法：使用DNA染色試劑（如：Hoechst 33258）對細胞進行染色，由于支原體中的核酸也可以被著色，所以，如果有支原體污染，會在細胞表面或者培養基中見到大小不等、不規則的熒光著色顆粒，與細胞核呈現的橢圓形、更大更亮熒光形成鮮明對比。
不同的實驗室可根據具體情況選擇不同的方法或幾種方法聯合使用以保證檢測的準確性和靈敏度。
