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elisa酶聯免疫試劑盒說明書實驗稀釋血清的操作方法

閱讀:537          發(fā)布時間:2017-5-25

elisa酶聯免疫試劑盒說明書實驗稀釋血清的操作方法
1、先把蛋白稀釋一定的倍數,比如說10倍、20倍稀釋(這樣可以大體確定一個參數),將抗原進行一系列稀釋包被微量反應板
2、再用一定稀釋度的陽性參考血清和陰性參考血清進行孵育后洗滌,再加酶結合物進行反應,經孵育洗滌后,加底物溶液顯色,終止反應后分別測定O.D值,選擇O.D值≥1.0的那個抗原稀釋度為zui適包被濃度。一般總是要選擇那個O.D值稍大于1.0,而不選擇小于1.0的抗原濃度。陰性參考血清O.D值要求<0.1-0.2。也就是要求陽性參考血清和陰性參考血清的O.D值有明顯差別。
在ELISA試劑盒實驗血清為什么要稀釋?有兩個原因:1、競爭抑制比較明顯,應稀釋競爭物;2、血清中含有的性腺激素比較低,應該濃縮才對。
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