化工儀器網
技術文章
兔血管內皮細胞粘附分子ELISA試劑盒操作事項
閱讀：221 發布時間：2019-6-12兔血管內皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒操作注意事項：
(1）試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
(2）實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
(3）不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
(4）使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
(5）使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
(6）洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
兔血管內皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒樣本處理及要求：
1. 血清：將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過一夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
2. 血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本，并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
3. 組織勻漿：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據實驗需要適當調整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。
4. 細胞培養物上清或其它生物標本：請1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。