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轉(zhuǎn)化細胞培養(yǎng)24 h, 采用ELISA、qRT-PCR、免疫細胞熒光染色和Western blot等方法檢測HH信號相關(guān)分子(Ptch1、Smo和Gli1)、TGF-β1、EMT相關(guān)分子(Rac1蛋白、肌成纖維細胞標志物α-SMA和上皮細胞標志物E-cadherin)、III型膠原mRNA或蛋白的表達。結(jié)果發(fā)現(xiàn), 外源性Shh上調(diào)Smo和Gli1表達, 抑制Ptch1表達, 繼而激活HH信號; HH信號活化抑制腎小管上皮細胞E-cadherin的表達, 上調(diào)α-SMA、III型膠原和TGF-β1的表達。環(huán)靶明干預后, Smo表達下調(diào), 進而抑
制HH信號、EMT和膠原累積, 并下調(diào)TGF-β1的表達。應用TGF-β1誘導小管上皮細胞EMT, 同時也上調(diào)HH信號分子Smo和Gli1的表達, 下調(diào)Ptch1的表達, 提示TGF-β1可誘導HH信號活化。綜上所述,HH信號和TGF-β1均參與了腎小管上皮細胞EMT和膠原累積過程。HH信號活化可促進TGF-β1的表達, 同時TGF-β1能激活HH信號, 推測TGF-β1與HH信號可能存在交叉對話以調(diào)控EMT和膠原累積。

Hedgehog-Gli1(HH)信號通路是一條進化保守的、與轉(zhuǎn)化細胞增殖分化密切相關(guān)的信號通路。正常表達的HH信號在人類發(fā)育過程中起著重要作用, 但持續(xù)異常激活的HH信號可導致胰腺癌和胃癌等多種腫瘤的發(fā)生。zui近研究發(fā)現(xiàn), HH信號活化與組織纖維化的發(fā)生密切相關(guān)。我們前期的研究結(jié)果顯示, 輸尿管梗阻或者馬兜鈴酸誘導腎小管上皮細胞表型轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)和細胞外基質(zhì)(extracellular matrix, ECM)累積過程中, HH信號均存在不同程度的活化, 同時伴有轉(zhuǎn)化生長因子TGF-β1的高表達。但HH信號與TGF-β1之間的相互關(guān)系及影響EMT和ECM累積的分子機制目前尚不清楚。本研究分別通過外源性重組蛋白活化HH信號和誘導TGF-β1高表達, 并進行藥物干預, 以觀察兩者間的對話, 評價其對EMT和ECM累積的影響。
UV法含量測定    100mg    100777-200401    醋氯芬酸
HPLC法含量測定    100mg    100778-200501    唑來膦酸
含量測定    100mg    100780-200801    鹽酸非那吡啶 
檢查用    50mg    100781-200501    格列美脲雜質(zhì)1（4-[2-（3-乙基-2-氧-吡珞啉-1-甲酰胺基）乙基]苯
含量測定    100mg    100782-200401    鹽酸阿扎司瓊 
檢查    50mg    100783-200401    鹽酸普萘洛爾
轉(zhuǎn)化細胞