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技術(shù)文章

培氟沙星殘留ELISA檢測試劑盒(抗生素殘留)樣品制備

閱讀:25          發(fā)布時間:2025-8-8

培氟沙星殘留ELISA檢測試劑盒(抗生素殘留)樣品制備:

1). 培氟沙星殘留ELISA檢測試劑盒(抗生素殘留)直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。

2). 過濾混濁溶液。

3). 除去樣品中的CO 2 (通過過濾)。

4 ). 通過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。

5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。

6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。

7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。

8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。

9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。

10).含脂肪的樣品用熱水提取。

為確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,樣品制備完成后需立即進(jìn)行檢測或妥善保存。對于需要短期儲存的樣品,建議置于4℃避光環(huán)境中,避免反復(fù)凍融;若需長期保存,應(yīng)分裝后冷凍于-20℃,檢測前需混勻并恢復(fù)至室溫。

檢測過程中需特別注意以下操作細(xì)節(jié):加樣時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡,微量移液器槍頭需緊貼酶標(biāo)板孔底部緩慢釋放液體;孵育階段需使用板膜密封酶標(biāo)板,防止溶液蒸發(fā);洗滌步驟需保證每孔加液量一致,甩板時力度均勻,避免交叉污染。若樣品濃度超出檢測范圍,需用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液進(jìn)行適當(dāng)稀釋后重新測定。

對于特殊基質(zhì)樣品(如蜂蜜、組織勻漿等),建議進(jìn)行加標(biāo)回收實驗以驗證前處理方法。同時,每批檢測應(yīng)設(shè)置陰性對照、陽性對照及標(biāo)準(zhǔn)曲線,標(biāo)準(zhǔn)品需按說明書要求進(jìn)行梯度稀釋。當(dāng)檢測值接近臨界值時,建議采用LC-MS/MS法進(jìn)行確證實驗。實驗廢棄物應(yīng)按實驗室生物安全規(guī)范處理,含抗生素的廢液需經(jīng)滅活后再排放。


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