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細胞接收后的操作流程與注意事項
閱讀：2453 發布時間：2017-3-27轉化細胞接收后的操作流程與注意事項
1. 您收到細胞時，若干冰已經*融化，請立即將細胞復蘇培養，切勿再次低溫凍存；若尚留有干冰，請立即將含有細胞的凍存管放入液氮中保存待用，并按條件貯存細胞，切不可將細胞置于高溫環境。
2. 請您在接收細胞后的4周內及時做復蘇培養，以確認細胞活力、狀態并保種。逾期恕不受理售后問題，謝謝合作！
3. BNCC凍存細胞采用優化配比的細胞凍存液，無需離心，細胞解凍后直接將250 ul細胞懸液滴入裝有8-10 ml*培養基的細胞培養瓶/培養皿中培養。
貼壁細胞常規培養傳代流程（請嚴格遵守無菌操作）
1. 吸出原培養瓶中的培養基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2~3 ml 含0.25% EDTA的胰酶進行消化（注意把握消化時間，通常控制在1~2min）；
2. 鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小時去掉胰酶，加6~8 ml *培養基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落、吹散；
3. 取出部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中，添加適當的*培養基，于培養箱中培養；
4. 注意培養基PH值變化情況，定期換液，待轉化細胞密度達到70-80%以后重復傳代操作或者凍存。
懸浮細胞常規培養傳代流程（請嚴格遵守無菌操作）
1. 懸浮細胞常規傳代操作為半量換液，分瓶傳代，即取出一半細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中，添加適當的*培養基，于培養箱中培養；也可根據細胞密度分多瓶傳代。
2. 注意培養基PH值變化情況，定期換液，待細胞密度達到70-80%時重復傳代操作或者凍存。
半貼壁半懸浮細胞培養注意事項（請嚴格遵守無菌操作）
1. 若懸浮細胞較多且折光率良好，可離心收集，繼續培養。
2. 若有少量細胞懸浮，也可不用收集，傳代操作按常規貼壁細胞操作流程處理。
3. 若懸浮細胞較多，離心收集，原瓶中貼壁細胞按照常規規貼壁細胞操作流程進行消化、終止消化、吹打，并與之前收集的懸浮細胞混懸，分瓶培養。
轉化細胞任何售后問題，均需拍照存檔并及時客服。