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轉化細胞的來源及解決方式

閱讀:255          發布時間:2017-9-20

由于體外培養的轉化細胞自身沒有抵抗污染的能力,而在培養基中加抗生素的抗污染能力也是有限的,因而細胞微生物污染一旦發生往往是無法挽救的。一般在細胞受到污染早期或污染較輕時,能及時處理并除去污染物,部分細胞還有可能得到挽救。但當細胞持續在污染環境中生長時,輕者細胞生長緩慢,分裂相減少,細胞變得粗糙,輪廓增強,胞漿中出現較多的顆粒物質;較重的細胞增殖停止,分裂相消失,細胞質中出現大量堆積物,細胞變圓或崩解,從瓶壁脫落。

不同的微生物污染物對細胞的影響也有差別,微生物中支原體和病毒對細胞形態和技能的影響是長期的,緩慢的和潛在的。而霉菌和細菌增殖迅速,能在很短的時間內抑制細胞生長或產生有毒物質殺滅細胞。

霉菌污染

表現:真菌的種類很多,污染的多是曲霉菌,白色念珠菌,酵母菌,黑霉菌,孢子菌等。霉菌污染后多數在培養液中形成淡黃色或是白色的漂浮物,一般肉眼可見,較易被發現,短期內培養液多不變混濁。倒置顯微鏡下可以看見細胞之間有縱橫交錯穿行的絲狀,樹枝狀或管狀菌絲,并漂浮在培養液中。很多菌絲在高倍鏡下可以看見鏈狀排列的菌株。念珠菌及酵母菌菌株呈卵圓形,散在細胞上及細胞周邊生長。有時通過顯微鏡可能會發現在培養瓶外壁生長的菌絲,較易誤認為污染。發現瓶外的菌絲后應及時用酒精擦拭干凈。

處理:首先,轉化細胞需確定污染物是細菌、真菌、支原體,還是酵母。現在你確認是霉菌污染。因此,盡快把污染細胞與其它細胞系隔離開,同時需要對實驗過程中所用的器材和試劑做處理。
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