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詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調控；
⑤細胞分化及其調控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
產品屬性：
英文名稱：Pamapimod
產品規格：1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg
發貨周期：1～3天
商品介紹：
Pamapimod是一種有效的p38增殖蛋白激酶抑制劑。Pamapimod可以抑制p38α和p38β的酶活性,IC50值分別為0.014±0.002和0.48±0.04μM。Pamapimod也能以IC50為0.06μm的效果抑制THP-1細胞的p38活性。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ CAS號：449811-01-2 別名：Ro4402257;R1503 純度：99.86% 分子量：406.38 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
棘孢青霉Bacillus licheniformis雞流行性乙型腦炎抗體IgG(JE IgG)
兔出血癥病Bacillus thuringiensis雞α葡萄糖苷(a-Glu)
Pseudomonas koreensisBacillus thuringiensis雞α葡萄糖苷(a-Glu)
地衣芽孢桿菌Bacillus thuringiensis雞血小板因子4(PF-4/CXCL4)
香菇Bacillus thuringiensis雞血小板因子4(PF-4/CXCL4)
枯草芽孢桿菌Bacillus thuringiensis雞腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3(TRAIL-R3)
膠質芽孢桿菌（可以訂購）Bacillus thuringiensis雞腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3(TRAIL-R3)
阿魏側耳Bacillus thuringiensis雞L解(PAL)
慢生根瘤菌Bacillus thuringiensis雞L解(PAL)
相思根瘤菌Bacillus thuringiensis雞煙酰腺二核苷磷(NADPH)
柱形胞鏈霉菌Bacillus thuringiensis雞煙酰腺二核苷磷(NADPH)
埃及無色需堿菌Bacillus thuringiensis雞B因子(BF)
球孢白僵菌Bacillus thuringiensis雞B因子(BF)
乳桿菌屬Bacillus thuringiensis雞5核苷(5-NT)
閃光口蘑Bacillus thuringiensis雞5核苷(5-NT)
Nocardioides agariphilusBacillus thuringiensis雞層連蛋白/板層(LN)
臂板蛋白3F抗體魯酵母星狀諾氏菌
臂板蛋白4C抗體西弗冠孢酵母葡糖桿菌
富含脯突觸相關蛋白SHANK1抗體嗜鞣質菅囊酵母石膏樣小孢子菌
性激結合球蛋白抗體木克酵母艱難梭菌 VPI 10463
p38增殖蛋白激酶抑制劑(Pamapimod)SCGB3A1 英文名稱： 結合珠蛋白家族3A1抗體 0.2ml
ETV6 英文名稱： 轉錄因子ETV6抗體 0.2ml
P-鈣粘附分子抗體 Anti-P-cadherin 0.1ml
Anti-Synaptotagmin-4/FITC 熒光素標記突觸結合蛋白4抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-NF1(Ser2817) 磷酸化1型神經纖維瘤抗體 規格 0.1ml
ECG2 (sophagus cancer-related gene-2) 食道癌相關基因(抗原)Multi-class antibodies規格： 0.5mg
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