化工儀器網
詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
GNF-5 | 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg | 1～3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：
GNF-5是GNF-2的類似物，具有更好的藥物動力學活性，是非ATP競爭性的Bcr-Abl抑制劑，IC50為0.22uM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ CAS號：778277-15-9 純度：98.0% 分子量：418.37 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
小鼠轉化生長因子β受體Ⅱ(TGFβR2)ELISA試劑盒 ，英文名： TGFβR2 ELISA Kit
犬胰島素受體β(ISR-β)ELISA檢測試劑盒CanineInsulieceptorβ,ISR-βELISAKIT 96T/48T
犬細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)免疫試劑盒 Dog iercellular adhesion molecule 1,ICAM-1/CD54 ELISA Kit
英文名稱HumanansferrieceptorELISAKit人轉鐵蛋白受體(TFR)ELISA試劑盒規格：96T/48T
超氧化物歧化酶(SOD)紅細胞裂解樣品制備試劑盒50次
Ratglycogensyhasekinase,GSKELISA試劑盒大鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA試劑盒規格：96T/48T
小鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-1sRⅠ ELISA Kit
大鼠轉化生長因子β1(TGF-β1)ELISA檢測試劑盒RatansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAkit 96T/48T
人Syndecan-1/CD138(SDC1)免疫試劑盒 Human SDC1 ELISA Kit
英文名稱MouseDHEA-SELISAKit小鼠去氫表雄同(DHEA-S)規格：96T/48T
TSH-BETA蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25次
rabbitN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISA試劑盒兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒規格：96T/48T
豬水通道蛋白4(AQP4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human tissue inhibitors of maix metalloproteinases 1 (TIMP-1) ELISA Kit 人基質金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒
GuineaPigEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit 豚鼠內皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
CLIAKitforANG-4(MouseAngiopoietin4)ELISAKit小鼠血管生成素4規格：48T/96T
血液丁酰膽堿酯酶活性比色法定量檢測試劑盒20次
PorcineFactor-relatedApoptosis,FASELISAKit豬凋亡相關因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒規格：96T/48T
Bcr-Abl抑制劑(GNF-5)SISP1 英文名稱： 應激誘導分泌蛋白1抗體 0.1ml
Phospho-eNOS (Thr113) 英文名稱： 磷酸化一氧化氮合成酶3(內皮型)抗體 0.1ml
N-鈣粘附分子抗體 Anti-N-cadherin 0.1ml
Anti-Phospho-SGK1 (Ser422) /FITC 熒光素標記磷酸化糖皮質激素調節激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-PAK2 (Ser20) 磷酸化p21激活激酶2抗體 規格 0.1ml
Akt/PKB 蛋白激酶B(抗原)Multi-class antibodies規格： 0.5mg
化工儀器網