公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:STK33抑制劑(ML281)
英文名稱:ML281
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
ML281是一個(gè)強(qiáng)的,有選擇性的STK33抑制劑,IC50值是14nM. 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1404437-62-2 純度:99.65% 分子量:389.47 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
嗜線蟲致病桿菌Bacillus thuringiensis山羊腫瘤壞死因子α(TNF-α)
耐久腸球菌Bacillus thuringiensis山羊β內(nèi)啡肽(β-EP)
黑木耳Bacillus thuringiensis山羊β內(nèi)啡肽(β-EP)
根瘤菌Bacillus thuringiensis山羊檢測(cè)(acetone)
中慢生華癸根瘤菌Bacillus thuringiensis山羊檢測(cè)(acetone)
暗孢節(jié)菱孢Bacillus thuringiensis鹿胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)
擬郎比可假絲酵母Bacillus thuringiensis鹿胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)
腸桿菌屬Lysinibacillus sphaericus鹿內(nèi)皮型一氧化氮合成(eNOS)
圈卷產(chǎn)色鏈霉菌Bacillus thuringiensis鹿內(nèi)皮型一氧化氮合成(eNOS)
灰綠犁頭霉Lysinibacillus sphaericus鹿血清淀粉樣蛋白A(SAA)
類芽孢桿菌Lysinibacillus sphaericus鹿血清淀粉樣蛋白A(SAA)
單胞菌Lysinibacillus sphaericus鹿紅膜蛋白(EMP)
異常威克漢姆酵母Lysinibacillus sphaericus鹿紅膜蛋白(EMP)
異常漢遜酵母Lysinibacillus sphaericus雙氫睪(DHT)
木霉Lysinibacillus sphaericus雙氫睪(DHT)
假單胞菌Lysinibacillus sphaericus魚孕激/孕
磷化尾部結(jié)構(gòu)蛋白抗體華麗腐霉菌百日咳鮑特菌
磷化T細(xì)胞激活核轉(zhuǎn)錄因子4抗體平頭致病性大腸埃希菌
磷化一氧化氮合成3內(nèi)皮型抗體尖鐮孢萎蔫專化型(棉花枯萎病菌)熱纖梭菌
磷化KB抑制蛋白β抗體大麗花輪枝孢(棉花黃萎病菌)云芝栓孔菌(斜面)
STK33抑制劑(ML281)Signal Peptide Peptidase 英文名稱: 信號(hào)肽肽酶SPP抗體 0.2ml
phospho-ERK5 (Thr218 + Tyr220) 英文名稱: 磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶5抗體 0.1ml
端粒結(jié)合蛋白1抗體 Anti-TRF1 0.2ml
Anti-TP-1/TEP1/FITC 熒光素標(biāo)記端粒酶相關(guān)蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-IRS1(Ser636/639) 磷酸化胰島素受體底物-1抗體 規(guī)格 0.1ml
glycoprotein (E1 glycoprotein) [Rubella virus] 風(fēng)疹病毒糖蛋白多肽片段Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg