詳細介紹
商品介紹:
Azazerine是競爭性谷氨酰胺酰胺轉移酶抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:115-02-6 別名:CN-15757;CI-337;O-Diazoacetyl-L-serine;P-165 純度:99.91% 分子量:173.13 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Azaserine | 1mL(10mM)|10mg|50mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
棲藻海桿狀菌Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母Saccharomyces cerevisiae
紫荊假諾氏菌Candida guilliermondii
佛雷德里克斯堡假單胞菌Saccharomyces cerevisiae
棕灰口蘑Candida kefyr
嗜油假單胞菌Saccharomyces cerevisiae
大腸埃希菌Candida valida
土星擬威爾酵母Pichia farinosa
蘇云金芽孢桿菌Pichia farinosa
小單孢菌Pichia membranifaciens
香菇*Saccharomyces cerevisiae
阿木吉氏鏈霉菌Saccharomyces cerevisiae
太湖類芽孢桿菌Saccharomyces cerevisiae
脆弱擬桿菌Saccharomyces cerevisiae
絳紅褐游動放線菌Saccharomyces bayanus
米曲霉Saccharomyces cerevisiae
小鼠髓樣分化因子88(MyD88)免疫試劑盒心肌錨蛋白重復結構域1抗體人嗜鉻蛋白A(CgA) 黃芪甲苷
小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)免疫試劑盒抑制蛋白結構域蛋白1抗體人嗜鉻蛋白A(CgA) 黃芪皂苷I
小鼠髓過氧化物特異性抗中性粒胞質抗體 免疫試劑盒抑制蛋白結構域蛋白2抗體人視網膜母瘤抑制蛋白(pRB) 黃芪皂苷II
小鼠髓過氧化物(MPO)免疫試劑盒抑制蛋白結構域蛋白3抗體人視網膜母瘤抑制蛋白(pRB) 黃芪皂苷III
谷氨酰胺酰胺轉移酶抑制劑(Azaserine)SCN8A 英文名稱: 鈉通道蛋白8α抗體 0.1ml
Anei-ENPP2 英文名稱: 自分泌運動因子抗體 0.1ml
肺表面活性蛋白B抗體 Anti-SP-B 0.1ml
Anti-TGM3/FITC 熒光素標記轉谷氨酰酶3抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-MAP4K4(Ser629) 磷酸化原活化蛋白激酶MAP4K4抗體 規格 0.1ml
phospho-ATF2(pSer490/pSer498) 磷酸化活化復制因子2抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg