詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
RR6 | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg | 1~3天 |
商品介紹:
RR6是一個有選擇性的,可逆的,有競爭性的vanin抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1351758-37-6 純度:99.69% 分子量:293.36 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
釀酒酵母小鼠Ⅰ型膠原Anti-SLC9A6 Antibody人性T淋巴相關抗原4(CTLA-4/CD152)
硬結節桿菌人抗Anti-SLC9A7 Antibody人免疫球蛋白輕鏈lambda(λ-IgLC)
香菇人抗核糖體P蛋白抗體Anti-SLC9A3R2 Antibody人免疫球蛋白輕鏈lambda(λ-IgLC)
枯草芽孢桿菌小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽Anti-SLC9A8 Antibody人肽-主要組織相容性復合體復合物(pMHC)
薄花邊皮傘大鼠單核趨化蛋白1Anti-SLCO1B1 Antibody人肽-主要組織相容性復合體復合物(pMHC)
癭青霉小鼠可溶性P選擇Anti-SLCO1A2 Antibody人皮膚淋巴相關抗原(CLA)
蘋果鏈格孢人抗骨骼肌抗體Anti-SLIT3 Antibody人皮膚淋巴相關抗原(CLA)
硫氧化檸檬胞菌大鼠單核趨化蛋白2Anti-SLIT2 Antibody人凝血血栓調節蛋白復合物(T-TM)
紅色鹽幾何形菌大鼠單核趨化蛋白3Anti-SLC9A9 Antibody人凝血血栓調節蛋白復合物(T-TM)
布氏乳桿菌人甲狀腺抗體Anti-SMAD1 Antibody人溶血補體(Hc)
枇杷假尾孢小鼠S100蛋白Anti-SLU7 Antibody人溶血補體(Hc)
平菇小鼠白介1Anti-SLK Antibody人T受體(TCR)
枯草芽孢桿菌人胰島抗體Anti-SMAD1 Antibody人T受體(TCR)
模擬乳粉霉菌酵母菌質控樣品(定量)大鼠巨噬集落激因子Anti-SMAD2 Antibody人狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)
黃色粘球菌*大鼠巨噬來源的趨化因子Anti-SMARCA2 Antibody人狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)
枯草芽孢桿菌人抗唾液腺導管組織抗體Anti-SMARCC2 Antibody人可溶性血纖蛋白單體復合物(SFMC)
環指蛋白98抗體血耳抗人谷光甘肽轉移單抗FMU-GST17
形成相關凋亡蛋白7抗體枝孢霉皰疹病毒單抗7
轉移生長因子β受體2抗體TGF-βRⅡ,TGFβRⅡ白黃小薄孔菌(斜面)ACV1
腫瘤壞死因子受體超家族成員14抗體教酒鏈霉菌H1H8
vanin抑制劑(RR6)彎孢霉 蕎麥堿
枯草芽孢桿 七葉皂苷
埃德爾鏈霉 米那普侖鹽酸鹽
腐皮鐮孢 萊菔
嗜熱假諾氏 苦味
平菇—佛羅里達 糠酸
嗜熱淀粉芽孢桿 維丁
竹喙球 巴他賽
香草蘭根疾 咖啡
根瘤 絹毛欖仁苷
鏈格孢 聚谷紫杉
紫棕炭團 九里香酮
草莖點霉 焦性沒食子酸
黑曲霉 甲基查爾酮
醬油曲霉 環巴