VEGFR2抑制劑(Ki8751)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-SLC33A1/FITC 熒光素標(biāo)記乙酰轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
C5 過敏毒素C5(補(bǔ)體C5)抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
谷氨酸受體2A抗體 Anti-NR2A/NMDAR2A 0.1ml
SLPI 英文名稱： 分泌型白細(xì)胞蛋白酶

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

大杯蕈Lactobacillus plantarum豬流感病A(FLU A)

蠟樣芽孢桿菌Lactobacillus plantarum豬孕激/孕(PROG)

假單孢菌Lactobacillus plantarum豬孕激/孕(PROG)

凍土毛霉Lactobacillus plantarum豬白介-5(IL-5)

黑曲霉Lactobacillus johnsonii豬白介-5(IL-5)

玫瑰色考克氏菌Lactobacillus brevis豬層連蛋白/板層(LN)

EscherichiaLactobacillus brevis豬層連蛋白/板層(LN)

釀酒酵母Lactobacillus johnsonii豬Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)  

異常威克漢姆酵母Lactobacillus mucosae豬Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)  

橄欖灰鏈霉菌Lactobacillus mucosae豬可溶性E選擇(sE-selectin)

嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌Lactobacillus fermentum豬可溶性E選擇(sE-selectin)

猴頭菌Lactobacillus oris豬白介13(IL-13)

德沃氏菌屬Lactobacillus reuteri豬白介13(IL-13)

茶葉  聯(lián)菊酯Lactobacillus mucosae豬轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGF-β2)

藤黃熒光馬杜放線菌Lactobacillus reuteri豬轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGF-β2)

枯草芽孢桿菌Lactobacillus oris豬E選擇(E-Selectin/CD62E)

zeta相關(guān)蛋白70抗體解朊假單胞菌浦那沙門氏菌三相變種

著絲粒蛋白抗體褪色沙雷氏菌退色亞種(粘質(zhì)沙雷氏菌, 粘質(zhì)塞氏桿菌, 淡化沙雷氏菌)香潘沙門氏菌

鋅指蛋白198抗體紫色桿菌嬰兒沙門氏菌

鋅指蛋白323抗體彎曲假單胞菌威奇塔沙門氏菌
VEGFR2抑制劑(Ki8751)干草鞘氨單胞 絡(luò)塞琳

假單胞 紅景天苷

綠木霉 黃楊堿

海水鹽單胞 丹參鈉

漆斑 纖維透析袋（100-500）

芽孢桿屬 隱丹參酮

假單胞屬 二氫丹參酮I

枯斑擬盤多毛孢 丹參酮I

產(chǎn)黃青霉 纖維透析袋（100-500）

木糖氧化產(chǎn)堿木糖氧化亞種 七葉皂苷鈉

葡萄酒  酒精度、甲 丹參酮IIA

同合根霉 丹酸B

德巴酵母屬 丹酸A

蔥頭伯克氏* 丹皮

細(xì)鏈格孢 薄荷