詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
MSC2530818 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
MSC2530818是有效,選擇性的CDK8抑制劑,抑制CDK8的IC50值為2.6nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1883423-59-3 純度:99.59% 分子量:340.81 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
孢青霉人游離蛋白SBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)
禽腺病Ⅴ型人異常凝血原Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠血清總補體(CH50)
紫花鏈霉菌人循環免疫復合物Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠血清總補體(CH50)
禾谷絲核菌人血小板相關抗體IgMBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)
黑曲霉人血纖肽/纖維蛋白肽ALactobacillus acidophilus小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)
Naumannella?人纖溶原Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠胰島(INS)
鐮刀菌人性T淋巴相關抗原4Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠胰島(INS)
麥根腐平臍蠕孢人免疫球蛋白輕鏈lambdaBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠低氧誘導因子1α(HIF-1α)
大腸埃希菌人肽-主要組織相容性復合體復合物Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠低氧誘導因子1α(HIF-1α)
云芝人皮膚淋巴相關抗原Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠新生甲狀腺(NN-T4)
樟疫霉人凝血血栓調節蛋白復合物Lactobacillus delbrueckii subsp. delbrueckii小鼠新生甲狀腺(NN-T4)
鱗皮扇菇人溶血補體Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠胰淀(Amylin)
粒落曲霉人T受體Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠胰淀(Amylin)
赭曲霉人狼瘡抗凝抗體Bacillus subtilis subsp. spizizenii小鼠游離狀腺原(Free-T3)
白僵菌人可溶性血纖蛋白單體復合物Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠游離狀腺原(Free-T3)
瓷珠菌種保存管菌種明細人血清白蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠白三烯C4(LTC4)
鋅指蛋白239抗體紋黑蛋巢菌大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細胞
鋅指蛋白426抗體云南半帚孢犬胸腺細胞
鋅指蛋白717抗體樺斜褐孔菌長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細胞
鋅指蛋白370抗體雷金斯堡預研菌豚鼠皮膚成纖維樣細胞
CDK8抑制劑(MSC2530818)扣囊內孢霉 巴弗洛霉A1
李色螺旋鏈霉 茴香霉
類芽胞桿 鄰青霉鈉
大腸埃希 它酮
綠孢環柄菇
間座殼屬 阿洛西林鈉
煙灰離褶傘 硫酸博來霉
藤黃微球 D-地衣酸
無 雷帕霉
黑根霉 克維酸
假單胞屬 吡酰
新硬毛革耳 阿維
互生毛霉 琥乙紅霉
南方散斑殼 鹽酸阿霉
蠟狀芽孢桿 磺甲噁唑