詳細介紹
商品介紹:
NMS-859是ATPase VCP/p97高效選擇性抑制劑,IC50約為0.37uM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1449236-96-7 純度:98.58% 分子量:349.79 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
產品屬性:
中文名稱:ATPase VCP/p97抑制劑(NMS-859)
英文名稱:NMS-859
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
蕈狀芽孢桿菌人血小板因子4Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠皮質(Cortisol)
微紫青霉人淋巴功能相關抗原2Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠促甲狀腺(TSH)
地絲雙足囊菌人白三烯E4Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠促甲狀腺(TSH)
釀酒酵母人D二聚體Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠甲基化(Methylase)
異常威克漢姆酵母人免疫球蛋白EBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠甲基化(Methylase)
地衣芽孢桿菌人髓系觸發受體-1Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠抗增殖核抗原抗體(PCNA)
德沃斯氏菌人白調節Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠抗增殖核抗原抗體(PCNA)
毛木耳781人血小板生成Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠脂蛋白脂(LPL)
米根霉人白血病抑制因子Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠脂蛋白脂(LPL)
金黃色葡萄球菌金黃亞種人Salusin-αBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠抗性磷5b(TRACP-5b)
冷桿菌屬人胰島受體底物2Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠抗性磷5b(TRACP-5b)
釀酒酵母人轉甲狀腺蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠葡萄糖依賴性胰島釋放多肽(GIP)
果生鏈核盤菌人晚期氧化蛋白產物Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠葡萄糖依賴性胰島釋放多肽(GIP)
灰黃青霉人胰島淀粉樣多肽Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠糖原磷化同工II(GP-II)
金針菇—雜交19人糖化蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠糖原磷化同工II(GP-II)
多主葡萄殼菌人糖化白蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠糖原磷化同工MM(GP-MM)
受精卵抑制蛋白1樣蛋白抗體蹄形干酪菌恒河猴肺細胞
鋅指蛋白ZBT10抗體梓鏈格孢棕果蝠肺成纖維細胞
鋅指蛋白BED抗體櫻桃鏈格孢棕果蝠皮膚成纖維細胞
2'-5'-寡腺苷合成3抗體薔薇生鏈格孢家豬皮膚細胞
ATPase VCP/p97抑制劑(NMS-859)平田頭菇 細辛脂
異常漢遜酵母 多粘B硫酸鹽
白僵 古倫賓
米根霉 霉鹽酸鹽
金黃色葡萄球 乙氧基白屈菜紅堿
枯草芽胞桿 頭孢唑啉鈉
狀鞘氨單胞 頭孢曲松鈉
帶小棒鏈霉 芫花
草酸青霉 四環
芽孢桿 鹽酸四環
潮汐藤黃色單胞 鏈脲佐
南假紅細 替西林鈉
釀酒酵母 莫能鈉
北京擲孢酵母 3,6′-二芥子酰基蔗糖
芽孢桿屬 血竭高酸鹽