詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
chroman 1 | 1mL(10mM)|5mg|10mg | 1~3天 |
商品介紹:
Chroman1是高活性ROCK II選擇性抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1273579-40-0 別名:ROCK-II inhibitor 純度:99.76% 分子量:436.5 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
芽胞桿菌小鼠α半乳糖基抗原Anti-RAB29 Antibody人蛋白S(Protein S)
郝氏青霉大鼠胃腸癌標志物CA199Anti-RAB2B Antibody人蛋白S(Protein S)
福山假絲酵母人幽門螺旋桿菌IgMAnti-RAB31 Antibody人可溶性血管內皮蛋白C受體(sEPCR)
蟲草大鼠血紅氧合1Anti-RAB29 Antibody人可溶性血管內皮蛋白C受體(sEPCR)
惡臭假單胞菌小鼠β基己糖苷AAnti-RAB33A Antibody人CCAAT增強子結合蛋白ε(C/EBPε)
粘質沙雷氏菌人相關蛋白AAnti-RAB35 Antibody人CCAAT增強子結合蛋白ε(C/EBPε)
頂頭孢霉大鼠磷脂A2Anti-RAB34 Antibody人CCAAT增強子結合蛋白δ(C/EBPδ)
白絨紅蛋巢菌小鼠肺表面活性物質相關蛋白AAnti-RAB37 Antibody人CCAAT增強子結合蛋白δ(C/EBPδ)
焦曲霉小鼠克蛋白Anti-RAB38 Antibody人CCAAT增強子結合蛋白α(C/EBPα)
總狀共頭霉大鼠組織因子途徑抑制物Anti-RAB40B Antibody人CCAAT增強子結合蛋白α(C/EBPα)
耐輻射奇球菌人胃抑Anti-RAB3GAP2 Antibody人2,3-二磷甘油(2,3-DPG)
散囊菌小鼠β半乳糖苷Anti-RAB3GAP2 Antibody人2,3-二磷甘油(2,3-DPG)
煙曲霉大鼠水通道蛋白5Anti-RAB3GAP1 Antibody人基膜聚糖/內腔蛋白(LUM)
釀酒酵母人胃泌釋放多肽Anti-RAB3IP Antibody人基膜聚糖/內腔蛋白(LUM)
光滑青霉人胃泌釋放肽前體Anti-RAB41 Antibody人Na+/H+交換體3(NHE3)
茯苓小鼠腎上腺Anti-RAB40B Antibody人Na+/H+交換體3(NHE3)
跨膜蛋白106B抗體國大鐘菇人膀胱移行細胞乳頭瘤細胞
腫瘤壞死因子誘導蛋白3相互作用蛋白1抗體青黃褐硬皮馬勃pCDNA3.1-his-TNFRSF4
瞬時受體電位通道蛋白4抗體地星TNFRSF4人源基因
神經元蛋白22抗體褐疣柄牛肝菌人小細胞肺癌細胞
ROCK II抑制劑(chroman 1)彎孢霉 BOC-L-異亮
乳酸鏈球 BOC-L-苯甘
傷寒沙門氏 BOC-D-苯甘
忍冬木層孔 BOC-D-谷
直立毛霉 BOC-L-谷
釀酒酵母 BOC-L-谷氨酰
矮小微桿 BOC-D-天冬酰
枯草芽孢桿 BOC-L-天冬酰
Corynebacterium variabile D-色氨
柱狀田頭菇(茶樹菇、楊樹菇) L-異亮氨
恩斯維希尼克氏酵母 L-纈氨
Paenibacillus L-蘇氨
枯草芽孢桿 L-蛋氨
蘑菇U3 D-脯氨
粉紅單端孢 D-苯甘氨