詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Voreloxin Hydrochloride | 1mL(10mM)|5mg|10mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
Voreloxin Hydrochloride是一種萘啶,為Topo II的抑制劑,具有抗腫瘤的活性。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:175519-16-1 別名:SNS-595 Hydrochloride;Vosaroxin Hydrochloride;AG 7352 Hydrochloride 純度:99.70% 分子量:437.9 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
魚肉 總孔雀石綠、結晶紫Pseudomonas corrugata大鼠抗凝血Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)
小孔菌屬Staphylococcus warneri大鼠神經肽Y(NP-Y)
氧化黃色桿菌Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis大鼠神經肽Y(NP-Y)
蠟狀芽孢桿菌Pseudomonas corrugata大鼠生長激釋放多肽(GHRP)
繩狀籃狀菌Lactobacillus rhamnosus大鼠生長激釋放多肽(GHRP)
巨孢毛霉Lactobacillus fermentum大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)
檸檬綠木霉Enterococcus faecalis大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)
尖孢鐮孢Leuconostoc lactis大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)
果生鏈核盤菌Leuconostoc mesenteroides subsp. mesenteroides大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)
尖鐮孢Enterococcus faecium大鼠血栓前體蛋白(TpP)
大腸埃希氏桿菌Enterococcus cecorum大鼠血栓前體蛋白(TpP)
鏈格孢Enterococcus hirae大鼠抑制B(INH-B)
靈芝Leuconostoc mesenteroides subsp. dextranicum大鼠抑制B(INH-B)
釀酒酵母Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis大鼠胰島受體β(ISR-β)
枯草芽孢桿菌Halorubrum saccharovorum大鼠胰島受體β(ISR-β)
意大青霉Haloferax mediterranei大鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)
突觸抗體/突觸相關蛋白-1肺形側耳(秀珍菇)低密度脂蛋白膽固(LDL-C)比色法測試盒(雙試劑直接法)
分泌抗體離褶傘植物抗逆性 植物抗逆性 植物抗逆性 植物抗逆性 植物抗逆性
子宮內膜抗體白鬼傘植物類黃比色法測試盒
碳氫鈉協同轉運蛋白4-A4抗體叢生地星植物總比色法測試盒
Topo II抑制劑(Voreloxin Hydrochloride)雞傷寒沙門氏 異阿魏酸
黃絮鱗鵝膏 馬脾鐵蛋白
pGEX-2T 內酯酮
扣囊復膜孢酵母 玉米蛋白
氣傳原小單孢 人血纖維蛋白原
枯草芽孢桿 石斛堿
淡紫擬青霉 牛血紅蛋白
球毛殼 10-姜
韓國苯基桿 鏈親和
韓國游動微 8-姜
尖孢鐮刀萎黃瓜專化型 卵白(雞蛋)
谷棒桿 人血清白蛋白(組份五)
缺陷短波單胞 7-羥基
紅根須腹 雞蛋清白蛋白
孢籃狀 松蘿酸