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詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
PD173955 | 1mL(10mM)|5mg|10mg | 1～3天 |
商品介紹：
PD173955是Src激酶家族選擇性抑制劑，對Src、Yes和Abl激酶IC50值約為22nM，對FGFR_alpha_抑制性弱，對InsR和PKC無活性。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ CAS號：260415-63-2 純度：98.88% 分子量：443.35 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
蘑菇Rhodopseudomonas palustris大鼠膽囊收縮/腸促胰肽(CCK)
桿菌Rhodobacter sphaeroides大鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)
光硬皮馬勃Rhodobacter sphaeroides大鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)
盤長孢狀盤孢Bifidobacterium longum subsp. sius大鼠6前列腺(6-K-PG)
釀酒酵母Bifidobacterium pseudolongum subsp. pseudolongum大鼠6前列腺(6-K-PG)
臭椿尾孢菌Bifidobacterium longum subsp. longum大鼠載脂蛋白A1(apo-A1)
HalomonasBifidobacterium magnum大鼠載脂蛋白A1(apo-A1)
球孢白僵菌Bifidobacterium dentium大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)
浩爾谷農球菌Bifidobacterium adolescentis大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)
棲熱菌屬Rhodovulum sulfidophilum大鼠25羥基維生D3(25(OH)D3/25 HVD3)
假根蘑菇Rhodopseudomonas sp.大鼠25羥基維生D3(25(OH)D3/25 HVD3)
黑曲霉Rhodocista pekingensis大鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)
鮑魚側耳Rhodobium marinum大鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)
謝瓦曲霉Blastochloris viridis大鼠Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)
蘇云金芽孢桿菌Bifidobacterium catenulatum大鼠Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)
中間氣單胞菌Haloferax denitrificans大鼠維生C(VC)
核糖核苷還原亞基R2抗體平菇禽腺病毒(3型)
Rho相關蛋白激2抗體銀絲草菇傳染性喉氣管炎病毒
G蛋白信號調節因子14抗體佛羅里達側耳家蠶微孢子蟲CQ1株
核轉錄因子NF-κB受體抗體核因子kB受體活化因子粉褶側耳巨型艾耳球蟲
Src激酶家族抑制劑（PD173955）解脂耶氏酵母 干酪
解淀粉芽孢桿 苯脲
香菇 甲殼
寡養單胞 葫蘆B
釀酒酵母 4'-去甲氧基表鬼臼
絲蓋小苞腳菇 鴨腳樹葉堿
多主葡萄殼 表木栓
牛雙歧桿 路路通酸
中慢生華癸根瘤 胡麻屬苷
產堿假單胞 次野鳶尾黃
嗜熱球形桿 石吊蘭甲
澳型核果褐腐病 白頭翁皂苷B4
植物乳桿 二氫歐山芹當歸酸酯
門多薩假單胞 紫菀酮
康氏木霉 白鮮堿
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