詳細介紹
商品介紹:
HMN-214(IVX214)是PLK1抑制劑,平均IC50為0.12μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:173529-46-9 別名:IVX-214 純度:98.91% 分子量:424.47 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
HMN-214 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
環狀芽孢桿菌Enterococcus durans subsp. fox大鼠基質金屬蛋白抑制因子1(TIMP-1)
釀酒酵母Micrococcus lylae大鼠堿性成纖維生長因子(bFGF)
孢籃狀菌Micrococcus luteus大鼠堿性成纖維生長因子(bFGF)
大腸埃希氏菌Halomonas pacifica大鼠巨噬炎癥蛋白5(MIP-5)
亮白曲霉Halomonas subglaciescola大鼠巨噬炎癥蛋白5(MIP-5)
黑木耳(8808)Halomonas aquamarina大鼠可溶性間粘附分子1(sICAM-1)
亮白曲霉Halomonas cupida大鼠可溶性間粘附分子1(sICAM-1)
委內瑞鏈霉菌Halomonas venusta大鼠可溶性血管粘附分子1(sVCAM-1)
白僵菌Halomonas halophila大鼠可溶性血管粘附分子1(sVCAM-1)
解脂假絲酵母Halomonas halmophila大鼠免疫球蛋白A(IgA)
根瘤菌Halomonas eurihalina大鼠免疫球蛋白A(IgA)
Lactobacillus murinus大鼠免疫球蛋白E(IgE)
枯草芽孢桿菌Halomonas salina大鼠免疫球蛋白E(IgE)
鴨疫里氏桿菌Pseudoalteromonas luteoviolacea大鼠免疫球蛋白G(IgG)
枯草芽孢桿菌Nesterenkonia halobia大鼠免疫球蛋白G(IgG)
枯草芽孢桿菌Chromohalobacter marismortui大鼠免疫球蛋白M(IgM)
ras癌基因家族Rab9蛋白抗體皺木耳大腸埃希氏菌DH5α/T/linker-gfp
ras癌基因家族Rab8蛋白/原癌基因cMEL抗體安諾小皮傘反卷毛殼
ras癌基因家族Rab3a抗體裂皮側耳放射土壤桿菌
ras癌基因家族Rab11蛋白抗體短裙竹蓀東北變種分枝桿菌屬菌種
PLK1抑制劑(HMN-214)曼小毛霉原變種 對基-β-D-吡喃木糖苷
狹截盤多毛孢 白樺脂
楚氏喜鹽芽孢桿 D(十)-無水葡萄糖
日本根霉 羽扇豆
釀酒酵母 羧化殼聚糖
球孢白僵 科羅索酸
Bacillus anthracis 玉米淀粉
紅色鹽顆粒形 草質苷
亮葉耳環根瘤 糖原Ⅸ
大腸桿屬 異鼠李-3-O-葡萄糖苷
膠孢(丁香炭疽病) 糖原Ⅲ
黑曲霉 人參皂苷CK
枯草芽孢桿 糖原Ⅱ
越南芽孢桿 人參皂苷F2
芽胞桿 黃芪多糖