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Eg5ATPase活性抑制劑(K858)

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更新時間:2022-05-16 13:44:54瀏覽次數(shù):501

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號 GOY-01X11850 應用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研 英文名稱 K858
Eg5ATPase活性抑制劑(K858)公司正在出售的產(chǎn)品:anti-OCLN(Occluding)/FITC 熒光素標記人咬合蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-dog IgG/HRP 辣根過氧化物酶標記兔抗狗IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
周期素依賴性激酶2抗體 Anti-CDK2 0.1m

詳細介紹

以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

發(fā)貨周期

Eg5ATPase活性抑制劑(K858)

K858

1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

1~3天

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:

K858選擇性抑制Eg5ATPase活性,IC50為1.3μM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

CAS號:72926-24-0

分子量:277.34

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

操作步驟:

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。

2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測:

染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。

2) 熒光顯微鏡檢測:

染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。

小鼠組織蛋白酶D(CTSD)ELISA試劑盒 ,英文名: CTSD ELISA Kit

綿羊白介素2(IL-2)ELISA檢測試劑盒SheepIerleukin2,IL-2ELISAKit 96T/48T

犬胰島素受體β(ISR-β)免疫試劑盒 Canine Insulin Receptor β,ISR-β ELISA KIT

英文名稱Mouse8-iso-ProstaglandinF2aELISAKIT小鼠8-異前列腺素F2α(8-ISOPGF2a)規(guī)格:96T/48T

不溶性GST融合蛋白溶解試劑盒10次

ratfollicle-stimulatinghormone,FSHELISA試劑盒大鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

小鼠白介素29(IL-29)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-29 ELISA Kit

大鼠白介素9(IL-9)ELISA檢測試劑盒RatIerleukin9,IL-9ELISAKIT 96T/48T

Toll作用蛋白(TOLLIP)免疫試劑盒 Human TOLLIP ELISA Kit

英文名稱RatneuropeptideYELISAKit小鼠神經(jīng)肽(NPY)規(guī)格:96T/48T

TNFALPHA蛋白免疫共沉淀分析試劑盒5次

Rabbitmaixmetalloproteinase1,MMP-1ELISA試劑盒兔基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

豬胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

People of cyclooxygenase 2 (COX-2) ELISA Kit 人環(huán)加氧酶2(COX-2)ELISA試劑盒

Rabbiturokinaseplasminogenactivator,uPAELISAkit 兔尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝

CLIAKitforAP13(Humanapelin13)ELISAKit人apelin13規(guī)格:48T/96T

血清樣品樹脂法去內(nèi)毒素試劑盒20次

PorcineIerleukin18,IL-18ELISAKit豬白介素18(IL-18)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Eg5ATPase活性抑制劑(K858)SMARCA2 英文名稱: ATP依賴解旋酶SMARCA2抗體 0.2ml

EGFL7 英文名稱: 類表皮生長因子域7抗體 0.1ml

硫酯包含蛋白-1抗體 Anti-Thioster-containing protein 1 1ml

Anti-TM/Biotin 生物素化血栓調(diào)節(jié)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-LAT (Tyr171) 磷酸化T細胞活化連接蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

BAFF/CD257(B cell activating factor) TNF家族B細胞激活因子抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

 


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