詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
TZ9 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
TZ9是泛素結合酶(E2enzyme)Rad6新型抑制劑,抑制MDA-MB-231細胞增殖的IC50值約為6uM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1002789-86-7 分子量:366.33 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
白僵菌Bacillus cereus大鼠巨噬來源的趨化因子(MDC/CCL22)
栗疫病菌Bacillus thuringiensis大鼠巨噬炎性蛋白2(MIP-2)
細交鏈孢霉Bacillus circulans大鼠巨噬炎性蛋白2(MIP-2)
發酵成對桿菌Bacillus circulans大鼠巨噬炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)
解脂假絲酵母Bacillus firmus大鼠巨噬炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)
麥根腐平臍蠕孢Bacillus thuringiensis大鼠基質金屬蛋白1(MMP-1)
類馬鏈球菌Bacillus megaterium大鼠基質金屬蛋白1(MMP-1)
副豬嗜血桿菌Brevibacillus brevis大鼠基質金屬蛋白10(MMP-10)
枯草芽孢桿菌Bacillus thuringiensis大鼠基質金屬蛋白10(MMP-10)
黏液桿菌Bacillus cereus大鼠基質金屬蛋白13(MMP-13)
蒼黃鏈霉菌Bacillus cereus大鼠基質金屬蛋白13(MMP-13)
禽腺病Ⅰ型Bacillus thuringiensis大鼠基質金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)
野尻鏈霉菌Bacillus thuringiensis大鼠基質金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)
球色單隔孢屬Bacillus cereus大鼠基質金屬蛋白3(MMP-3)
糞生毛殼Bacillus globisporus大鼠基質金屬蛋白3(MMP-3)
彩色豆馬勃Bacillus cereus大鼠基質金屬蛋白7(MMP-7)
RhoC抗體梭菌奧寧堡沙門氏菌
增殖潛能相關蛋白抗體嗜金屬熱厭氧桿菌仙臺沙門氏菌
磷脂酰乙胺結合蛋白1抗體溶紙梭菌布武沙門氏菌
細胞遷移誘導因子5抗體熱袍菌艾斯奇沙門氏菌
Rad6抑制劑(TZ9)秦氏蜜環 L-4-羥基異亮
頭狀莖點霉 低聚異麥芽糖
*味牛肝 低聚果糖
枯草芽孢桿 B 草烏甲
里氏木霉 圣草
頂孢頭孢霉 圣草次苷
海環桿 補骨脂
曲霉屬 青陽參苷元B
蠟狀芽孢桿 麥芽糖
果蔬汁 op'-DDT、乙草、莠滅凈、 死蜱、惡唑、噻蟲 D-泛
堿式碳酸鎂
鼠李糖乳桿 脫氫乙酸
肺炎克雷伯氏鼻硬結亞種 葡萄糖酸
短小芽孢桿 葡萄糖酸銅
絲狀支原體絲狀亞種 葡萄糖酸鎂