詳細介紹
商品介紹:
Purvalanol A是一種有效的CDK抑制劑,對cdc2-cyclin B,cdc2-cyclin B,cdk2-cyclin E,cdk4-cyclin D1和cdk5-p35的IC50值分別為4,70,35,850和75nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:212844-53-6 別名:NG-60 純度:98.27% 分子量:388.89 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Purvalanol A | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
戊糖片球菌*大鼠堿性成纖維生長因子Anti-S100A3 Antibody人凝血(TM)
羅伊氏乳桿菌小鼠補體片斷3aAnti-S100A7L2 Antibody人Ⅶ(FⅦ)
熱噬淀粉芽孢桿菌人抗浦肯野抗體/抗Yo抗體Anti-S1PR1 Antibody人Ⅶ(FⅦ)
枯草芽孢桿菌大鼠巨噬炎癥蛋白5Anti-S100Z Antibody人可溶性白抗原G(sHLA-G)
白黃小脆柄菇小鼠17羥孕Anti-SAA4 Antibody人可溶性白抗原G(sHLA-G)
假木豆根瘤菌人抗Sa抗體Anti-S1PR4 Antibody人凝血原(PT)
土星漢遜酵母人抗神經元核抗體2型/抗Ri抗體Anti-SAE1 Antibody人凝血原(PT)
蠟樣芽胞桿菌 (蠟狀芽胞桿菌)小鼠間粘附分子1Anti-SAR1B Antibody人補體因子D(CFD)
天藍色鏈霉菌小鼠卵泡抑Anti-SCAF1 Antibody人補體因子D(CFD)
粘紅酵母大鼠可溶性血管粘附分子1Anti-Sam 68 Antibody人血漿纖維連接蛋白(pFN)
淺黃小孢絲鏈霉菌人異質型核糖核蛋白復合物/抗RA33抗體Anti-SARNP Antibody人血漿纖維連接蛋白(pFN)
彎孢菌小鼠組織蛋白去乙酰化Anti-SAMHD1 Antibody人纖維連接蛋白(cFn)
釀酒酵母人抗Q熱抗體Anti-SCAF4 Antibody人纖維連接蛋白(cFn)
藤黃節桿菌小鼠雌三Anti-SCAF4 Antibody人總蛋白S(TPS)
巨大芽孢桿菌大鼠免疫球蛋白AAnti-SCAMP1 Antibody人總蛋白S(TPS)
肉褐鱗環柄菇小鼠雄烯二Anti-SCAF4 Antibody人血清剝奪反應相關蛋白(SDPR)
硫氧還蛋白5抗體蟬花1-4(蟬擬青霉)(斜面)抗人微管a蛋白單抗7
轉錄因子Tbx18抗體裂殖酵母抗人TATA框結合蛋白交互作用蛋白單抗7
糖皮質激誘導腫瘤壞死因子受體抗體茄腐鐮刀菌抗人轉鐵蛋白單抗7
胸腺基質淋巴細胞生成-1抗體人厚垣普奇尼亞菌抗人肝癌單抗F117
CDK抑制劑(Purvalanol A)側耳 覆盆子酮葡萄糖苷
釀酒酵母 L-脯甲酯鹽酸鹽
Paraburkholderia sp. 二鈉
大豆慢生根瘤 L-苯甘乙酯鹽酸鹽
毛木耳 兒茶精水合物
香菇 L-苯甘甲酯鹽酸鹽
根瘤 對羥基苯酸
解脂亞羅酵母 短葉蘇木酸
球毛殼 L-苯乙酯鹽酸鹽
蠟狀芽孢桿 地骨皮甲
皺木耳 L-苯甲酯鹽酸鹽
粉紅單端孢 燈盞花乙甲酯
圍小叢殼 L-甲硫乙酯鹽酸鹽
草木樨中華根瘤 草夾竹桃苷
pSV-Beta-Gal 蒼術苷鹽