詳細介紹
商品介紹:
B-Raf IN1是B-Raf和c-Raf抑制劑,IC50分別為24nM和25nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:950736-05-7 分子量:515.53 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
B-Raf IN 1 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
小鼠左右決定因子2(LEFTY2)ELISA試劑盒 ,英文名: LEFTY2 ELISA Kit
鴨白介素2(IL-2)ELISA檢測試劑盒DuckIerleukin2,IL-2ELISAkit 96T/48T
犬誘導型一氧化氮合成酶(iNOS)免疫試劑盒 Dog inducible niic oxide syhase,iNOS ELISA Kit
英文名稱MouseCXCL12ELISAKit小鼠B-淋巴細胞趨化因子12(CXCL12)規格:96T/48T
冰凍切片組織線粒體復合物I蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次
RatFactorⅧ-relatedAigen,FⅧAgELISA試劑盒大鼠第八因子相關抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒規格:96T/48T
小鼠白介素35(IL-35)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat heat shock factor 1 (HSF1) ELISA Kit 大鼠熱休克因子1(HSF1)ELISA試劑盒
Humayrosinekinase2,Tyk-2ELISAKit 人酪氨酸激酶2(Tyk-2)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
HumanCalretinin,CRELISA試劑盒人鈣結合蛋白(CR)ELISA試劑盒規格:96T/48T
重組逆轉錄病毒穩態表達細胞克隆凍存試劑盒50次
Humansolubleierleukin-1receptorⅠ,IL-1sRⅠELISAKit人白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒規格:96T/48T
豬組胺(HIS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human lipid peroxide / lactoperoxidase (LPO) ELISA Kit 人過氧化脂質/乳過氧化物酶(LPO)ELISA試劑盒
RabbitThrombinactivatablefibrinolysisinhibitor,TAFIELISAKit 兔纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
CLIAKitforApo-E(MouseApolipoproteinE)ELISAKit小鼠載脂蛋白E規格:48T/96T
溴脫氧尿嘧啶核苷(BrdU)溶液(1毫摩爾)1毫升
PorcineMelatonin,MTELISAKit豬褪黑素(MT)ELISA試劑盒規格:96T/48T
B-Raf和c-Raf抑制劑(B-Raf IN 1)ZnT-1 英文名稱: 鋅轉運蛋白1抗體 0.2ml
DHRS2 英文名稱: 脫氫酶/還原酶家族成員2抗體 0.1ml
磷酸化APP(Tyr757)淀粉樣肽前體蛋白抗體 Anti-phospho-APP 0.1ml
Anti-AFP/Biotin 生物素化鼠抗人甲胎蛋白單克隆抗體(檢測)IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-eNOS(Ser1177) 磷酸化一氧化氮合成酶3抗體(內皮型) 規格 0.1ml
E2F1 轉錄因子E2F-1Multi-class antibodies規格: 0.5mg