詳細介紹
商品介紹:
TH287是MTH1(NUDT1)高效選擇性抑制劑,IC50值0.8nM,對MTH2,NUDT5,NUDT12,NUDT14等抑制力弱。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1609960-30-6 純度:98.11% 分子量:269.13 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
TH287 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
干酪乳桿菌Escherichia coli大鼠吡啶(PYD)
香魏菇Escherichia coli大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解2(BACE2)
褐帶栓菌Escherichia coli大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解2(BACE2)
銅綠假單胞菌Escherichia coli大鼠骨堿性磷(BALP)
枯草芽孢桿菌Escherichia coli大鼠骨堿性磷(BALP)
Rhizobium miluonense Escherichia coli大鼠凝聚(CLU)
金黃色葡萄球菌Escherichia coli大鼠凝聚(CLU)
鼠傷寒沙門氏菌 TA102Escherichia coli大鼠轉化生長因子β激蛋白22(TSC22)
金龜子綠僵菌Escherichia coli大鼠轉化生長因子β激蛋白22(TSC22)
寬褶菇Escherichia coli大鼠白介32(IL-32)
棲土藤黃色單胞菌Escherichia coli大鼠白介32(IL-32)
橙灰鏈霉菌Escherichia coli大鼠孕受體(PROGR)
核盤菌Escherichia coli大鼠孕受體(PROGR)
毛蓋木耳Escherichia coli大鼠白介21(IL-21)
食砜節桿菌Escherichia coli大鼠白介21(IL-21)
釀酒酵母Escherichia coli大鼠D-乳脫氫(D-LDH)
磷脂酰肌激3催化亞單位3抗體腫紅皮孔菌團頭魴尾鰭細胞
磷脂酰肌激p85β抗體奶油泊氏孔菌白鰱尾鰭細胞系
三磷腺苷受體受體P2X2抗體亞瑪針層孔菌散鱗鏡鯉尾鰭細胞
芳香酯1對氧磷抗體茶褐針層孔菌人胎兒胸腺細胞株
MTH1(NUDT1)抑制劑(TH287)果香地霉 維生D2
大腸埃希 維生C
漢遜德巴酵母fabryi變種 疊氮鈉葡萄糖肉湯
拱狀靈芝 維生B6
寬雄腐霉 肉浸液肉湯培養基
中山小短桿 維生B2
柿尾孢 匹克氏肉湯基礎A
沙漠奇異球 維生B12
枯草芽孢桿枯草亞種 維生B1
微白黃鏈霉 葡萄糖肉浸液肉湯
樹靈芝 維生A酸
黑曲霉 維生A醋酸酯
玫瑰小雙孢玫瑰亞種 脫水羊藿
土曲霉 卵黃瓊脂培養基基礎
黑曲霉 脫水內酯琥珀酸半酯