化工儀器網(wǎng)
技術文章
茁彩生物?油紅O染色（油紅O脂肪染色法）
閱讀：731 發(fā)布時間：2023-5-16油紅O脂肪染色法是指在日常病理診斷和科研工作中為了顯示組織內(nèi)的脂肪常采用油紅O進行染色的方法，油紅O為脂溶性染料，在脂肪內(nèi)能高度溶解，可特異性的使組織內(nèi)甘油三酯等中性脂肪著色。
在病理檢驗中，脂類染色法常用以證明脂肪變性，脂肪栓子以及腫瘤的鑒別。脂類染色使用廣泛的染料是蘇丹染料，常用的有蘇丹Ⅲ，蘇丹Ⅳ，蘇丹黑及油紅O等。蘇丹類的油紅O染料在脂類中的溶解度大于在有機溶劑的溶解度，所以染色時染料便從染液中轉(zhuǎn)移到被染的脂質(zhì)中去，使脂質(zhì)顯現(xiàn)出紅色。經(jīng)研究認為組織中脂質(zhì)在液態(tài)或半液態(tài)時，對蘇丹染料著色效果好。根據(jù)這一原理，適當提高溫度（37℃-60℃）對組織切片染色效果是有好處的。
實驗流程：
1、 固定：將冰凍切片復溫干燥10min；細胞爬片4%多聚甲醛固定15min，PBS漂洗3次，5min/次。
2、 染色：入油紅O工作液孵育10-15min；細胞爬片破膜10-15min，PBS漂洗3次，5min/次，入油紅O工作液37°染色1-2h。
3、 分化：75%酒精分化2s，水洗1min。
4、 復染細胞核：Harris蘇木素復染1-2min左右，自來水洗，1%的鹽酸酒精分化數(shù)秒，自來水沖洗，氨水返藍，流水沖洗。
5、 封片：用紙巾吸去周邊水分，甘油明膠封片。染色結(jié)果：脂滴呈橘紅色至鮮紅色，細胞核藍色。
實驗結(jié)果展示：
