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什么是植物細胞程序性死亡的TUNEL檢測？
閱讀：259 發布時間：2024-6-6植物細胞程序性死亡（programmed cell death，PCD）是植物生長發育過程或環境脅迫下，由基因調控主動移除多余的、受傷細胞的過程。PCD 從胚胎發生一直到個體的死亡，伴隨植物生長發育的每個階段，包括胚胎發育過程中胚柄細胞的移除、單子葉植物種子萌發過程中糊粉層的解體、木質部管狀分子的分化、通氣組織和表皮毛的形成、性別的決定、花藥絨氈層的降解、花器官的脫落、花粉的自交不親和、葉片形狀的重構和葉子的衰老等。
同時，PCD 也參與了植物的免疫反應和對環境信號的應答，如真菌入侵后的超敏反應；高濃度鹽、溫度、重金屬離子、紫外線等均能誘導植物 PCD。植物 PCD 過程中，會表現出細胞核的凝聚、DNA 的片段化、細胞質凝集和質膜塌陷等現象。其中細胞核的變形及 DNA 的片段化是 PCD 過程的關鍵特征。因此，利用 4'，6-蘇基-2-苯基吲哚（DAPI）標記和末端脫氧核糖核苜酸轉移酶（TdT）介導的脫氧核昔酸缺口末端標記法（TUNEL 檢測），可觀察到 PCD 過程中，細胞核的形態變化及 DNA 的片段化。基因組 DNA 會發生斷裂降解，會產生的一系列 DNA 的 3'-OH 端。在末端脫氧核糖核昔酸轉移酶的作用下，可將脫氧核糖核昔酸和熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸化酶形成的衍生物標記到 DNA 的 3'-OH 端，在熒光顯微鏡下可觀察到熒光。
花蜜腺是分布于花器官中的一類分泌糖類的腺體，用于吸引昆蟲傳粉。當完成傳粉后，部分植物的蜜腺也失去存在的意義，因此，蜜腺會通過 PCD 途徑而逐漸解體。圓葉牽牛分布廣泛，花期短，其花蜜腺是檢測 PCD 特征理想材料。