透射電鏡制備注意事項(細(xì)胞)

1、細(xì)胞數(shù)量: > 1*10的6次方;

2、消化細(xì)胞時要注意不要過度，及時用含血清的培養(yǎng)液終止消化;

3、終止消化后，預(yù)冷的PBS (pH 7.4 )洗細(xì)胞1-2次離心(1500rpm, 5min)棄上清(細(xì)胞收集在1.5ml的EP管中) ;

4、加入1mL 2.5%戊二醛溶液(需用PBS配制該溶液)，可用吸管輕輕吹散細(xì)胞，使細(xì)胞懸浮于固定液中;

5、4度固定過夜后寄出 (寄送時加冰袋，并用2.5%戊二醛溶液將EP管中剩余空間充滿)。

腎臟組織樣本制備步驟：

1、迅速取材；2、PBS漂洗2次，切成小塊（米粒大小）；3、快速放入2.5%戊二醛固定液中，4度固定過夜；4、固定液將整個容器里面的空間都充滿，封口膜封口；5、多加冰袋運輸。