HSF95 Insect Cell Medium 昆蟲培養(yǎng)基 CW003（2025 版）產(chǎn)品介紹

一、產(chǎn)品概述

CW003 昆蟲培養(yǎng)基專為 sf9、High Five 等昆蟲細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)和瞬時(shí)表達(dá)設(shè)計(jì)，內(nèi)含細(xì)胞生長(zhǎng)所需的全部營(yíng)養(yǎng)成分，無(wú)需額外添加其他物質(zhì)即可直接使用，極大簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作流程。

二、核心優(yōu)勢(shì)

1. 無(wú)血清配方：有效避免血清批次差異、外源因子污染等問(wèn)題，為細(xì)胞培養(yǎng)提供更穩(wěn)定的環(huán)境。

2.   即用型設(shè)計(jì)：開箱即可使用，無(wú)需進(jìn)行復(fù)雜的成分添加和調(diào)配，節(jié)省實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備時(shí)間。

3.   高效培養(yǎng)：支持 sf9、High Five 等昆蟲細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)馴化與高密度培養(yǎng)，顯著提升細(xì)胞培養(yǎng)效率。

4.   基因表達(dá)支持：與桿狀病毒載體表達(dá)系統(tǒng)高度適配，可高效生產(chǎn)重組基因蛋白，為科研與生產(chǎn)提供可靠保障。

三、基礎(chǔ)參數(shù)

（此處待補(bǔ)充具體基礎(chǔ)參數(shù)內(nèi)容）

四、使用方法

（一）細(xì)胞馴化與傳代

1. 培養(yǎng)條件：溫度設(shè)定為 27℃，搖床轉(zhuǎn)速保持在 110 - 130 rpm；傳代時(shí)，細(xì)胞密度需控制在 0.8 -      1.2×10? cells/mL，以維持細(xì)胞的良好生長(zhǎng)狀態(tài)。

2.   直接馴化：在多數(shù)情況下，使用其他培養(yǎng)基培養(yǎng)的 sf9、High Five 細(xì)胞，可直接通過(guò)日常傳代稀釋的方式更換至 CW003 培養(yǎng)基，細(xì)胞能夠自然適應(yīng)新的培養(yǎng)環(huán)境。

3.   漸進(jìn)式馴化

• 操作要點(diǎn)：選擇低代次且處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行馴化。

• 具體步驟：首先在原培養(yǎng)基中復(fù)蘇細(xì)胞，并使用原培養(yǎng)基連續(xù)傳代 2 - 3 次，直至細(xì)胞生長(zhǎng)穩(wěn)定。隨后，采用原培養(yǎng)基與 CW003 培養(yǎng)基混合的方式逐步馴化（CW003 比例從 25% 逐步遞增至 90%），傳代細(xì)胞密度控制在 0.8 - 1.1×10? cells/mL，每 48 小時(shí)傳代一次。當(dāng)細(xì)胞在含 90% 以上 CW003 培養(yǎng)基中生長(zhǎng)狀態(tài)良好后，可嘗試將細(xì)胞傳代至 100% CW003 培養(yǎng)基，并連續(xù)傳代 3 - 4 次。若細(xì)胞仍能保持穩(wěn)定生長(zhǎng)，即表明細(xì)胞已成功適應(yīng) CW003 培養(yǎng)基。

（二）細(xì)胞復(fù)蘇

1. 從凍存設(shè)備中迅速取出細(xì)胞，在 37℃水浴環(huán)境下快速解凍，解凍過(guò)程中可輕輕晃動(dòng)凍存管，確保解凍均勻，整個(gè)過(guò)程需控制在 120 秒以內(nèi)，當(dāng)凍存管內(nèi)僅剩余小塊冰晶時(shí)停止。

2.   在生物安全柜內(nèi)，將融化后的細(xì)胞全部轉(zhuǎn)移至無(wú)菌離心管中，加入 10 mL 預(yù)熱至 37℃的培養(yǎng)基，以 175 g 的離心力離心 5 分鐘，棄去上清液，再加入 20 - 30mL 預(yù)熱至 37℃的新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，最后轉(zhuǎn)移至搖瓶中進(jìn)行培養(yǎng)。

（三）細(xì)胞凍存

1. 凍存細(xì)胞應(yīng)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期、狀態(tài)良好且活力≥98% 的細(xì)胞，以保證凍存后細(xì)胞的復(fù)蘇成功率。

2.   提前計(jì)算所需凍存的細(xì)胞管數(shù)和培養(yǎng)基體積，凍存密度推薦為 2.5 - 3.5×10? cells/ml/ 支（常規(guī)凍存濃度為 1.0 - 2.0×10? cells/ml/ 支）。

3.   凍存液配制：將 45% 新鮮培養(yǎng)基、45% 原培養(yǎng)基（上清）和 10% DMSO 充分混合均勻，配制好的凍存液存放于 4℃環(huán)境，建議當(dāng)天配制當(dāng)天使用。

4.   以 175 g 離心力離心 5 分鐘收集細(xì)胞，棄去上清液，使用 4℃預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。

5.   將重懸后的細(xì)胞液迅速分裝至無(wú)菌凍存管中，每管 1ml，并做好清晰的標(biāo)簽標(biāo)記。

6.   將細(xì)胞凍存管放入填充有異丙醇并經(jīng) 4℃預(yù)冷的程序降溫凍存盒中，置于 - 80℃冰箱（降溫速率為每分鐘下降 1℃）過(guò)夜，次日將細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮罐中長(zhǎng)期保存。

上述潤(rùn)色使產(chǎn)品介紹更專業(yè)規(guī)范。若你覺(jué)得某些部分還需調(diào)整，或想補(bǔ)充更多信息，歡迎隨時(shí)告訴我。