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　　摘要
　　骨關節(jié)炎模型,動物模型,構建動物模型實驗,動物造模,大鼠模型,模型大鼠
　　骨關節(jié)炎(osteoarthritis, OA)是一種關節(jié)慢性退行性疾病，主要臨床癥狀為關節(jié)疼痛、僵硬、畸形和功能障礙。
　　OA通常發(fā)生于老年人，研究表明超過一半的65歲以上老年人都有癥狀性或影像學上的OAP。OA會導致患者肢體殘疾和生活質(zhì)量嚴重下降，其主要治療方式包括減少關節(jié)負重、藥物治療、物理治療和手術治療。
　　二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)是一種n-3多不飽和脂肪酸，與二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid, EPA)相同，不飽和雙鍵起始于甲基端的第3個碳原子上。DHA和EPA的天然來源主要是海洋動物，如貝類、甲殼類、魚類，特別是鰭、鮭、鯡、沙丁魚等，是飲食中重要的營養(yǎng)物質(zhì)。
　　研究發(fā)現(xiàn)，DHA對多個系統(tǒng)具有廣泛而明確的抗炎作用，并應用于包括心血管疾病、炎癥性腸病、肥胖、糖尿病、非酒精性脂肪肝等多種炎癥性疾病的實驗動物模型和臨床試驗中。但目前DHA對OA炎癥反應的抑制活性及其對關節(jié)軟骨的保護能力尚不清楚。
　　本研究在體外實驗中，利用大鼠OA模型測定DHA對OA關節(jié)軟骨的影響，并測定細胞凋亡、自噬及炎癥相關蛋白的表達，以了解DHA對OA關節(jié)軟骨的影響及機制。
　　目的
　　研究二十二碳六烯酸(DHA)對大鼠骨關節(jié)炎(OA)關節(jié)軟骨組織退變的影響，并初步探討其機制。
　　方法
　　手術切除內(nèi)側半月板、切斷前交叉韌帶構建大鼠OA動物模型，并采用富含DHA的飼料喂養(yǎng)；同時采用假手術或正常飼料喂養(yǎng)進行對照。HE染色、甲苯胺藍染色、番紅O-固綠染色觀察關節(jié)軟骨組織退變程度，采用改良Mankin評分評價番紅O-固綠染色標本關節(jié)軟骨組織損傷；采用免疫組織化學染色法檢測關節(jié)軟骨組織中Ⅱ型膠原的表達；采用蛋白印跡法檢測關節(jié)軟骨組織中哺乳動物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)、Beclin-1及通路蛋白磷酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(p-ERK)、磷酸化氨基末端蛋白激酶(p-JNK)、磷酸化p38蛋白(p-p38)的表達；microCT觀察軟骨下骨的結構變化。
　　結果
　　口服DHA減輕OA大鼠關節(jié)軟骨退變程度，并顯著降低Mankin評分；免疫組織化學染色結果顯示DHA可提高軟骨細胞Ⅱ型膠原陽性表達率；蛋白印跡法檢測結果顯示DHA可減少關節(jié)軟骨組織中mTOR和MMP-13的表達，并增加Beclin-1的表達；microCT顯示DHA可改善骨小梁微細結構，減少軟骨下骨囊變及硬化；通路蛋白檢測顯示DHA可顯著抑制p-p38的表達。

　　結論
　　DHA可有效減輕OA大鼠關節(jié)軟骨退變及損傷，并改善軟骨下骨微細結構。這一作用通過增加軟骨細胞Ⅱ型膠原和Beclin-1的表達，并降低mTOR和MMP-13的表達而實現(xiàn)。DHA的作用機制為抑制p38通路。