熒光素酶報告基因是指以熒光素(luciferin)為底物來檢測螢火蟲熒光素酶(fireflyluciferase)活性的一種報告系統(tǒng)。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的過程中，會發(fā)出生物熒光(bioluminescence)。

螢火蟲螢光素酶

通用和常見的報告基因是北美螢火蟲photinus pyralis的熒光素酶，該蛋白質(zhì)不需要翻譯后修飾即可獲得酶活性。高濃度（體內(nèi)）甚至沒有毒性，可用于原核和真核細(xì)胞。

Amplite™熒光素酶報告基因檢測試劑盒

圖1.在帶有NOVOstar讀板器（BMG Labtech）的白色96孔板中，使用Amplite™熒光素酶報告基因基因檢測試劑盒檢測螢光素酶劑量反應(yīng)。該試劑盒可在20min-5h的孵育時間內(nèi)檢測到低至0.1pg /孔的螢光素酶，而不會丟失信號強度。半衰期超過4小時。

Amplite™熒光素酶報告基因檢測試劑盒（12518）使用無DTTzhuanli配方來定量活細(xì)胞和細(xì)胞提取物中的螢光素酶活性。該測定基于螢火蟲熒光素酶，螢火蟲熒光素酶是一種單體的61 kD酶，可催化熒光素的兩步氧化，在560 nm處產(chǎn)生光。

Amplite™熒光素酶報告基因檢測試劑盒（12518）特點：

具有優(yōu)化的“混合讀取”測定規(guī)程，可與HTS液體處理儀器兼容

具有高靈敏度，可用于需要低檢測限的測定

具有用于研究基因調(diào)控和功能的快速，簡單且均一的生物發(fā)光測定法

與標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞生長培養(yǎng)基的使用兼容

高斯熒光素酶

近年來，其他熒光素酶（例如高斯熒光素酶）的使用有所增加，因為這些報告基因較小，并且不需要ATP的存在。高斯熒光素酶是一種20 kD的蛋白質(zhì)，可通過氧氣催化腔腸素氧化，產(chǎn)生光。來自于海洋足類高斯氏菌的生物發(fā)光酶在表達(dá)后可有效地從哺乳動物細(xì)胞中分泌出來。

Amplite™高斯熒光素酶報告基因測定

圖2.用Amplite高斯熒光素酶報告基因測定試劑盒和其他某品牌高斯熒光素酶報告基因測定試劑盒（紅線）在96孔白板中使用NOVOstar讀板儀測量分泌的高斯熒光素酶培養(yǎng)基對比圖。

Amplite™高斯熒光素酶報告基因檢測試劑盒使用專有的發(fā)光配方來定量細(xì)胞培養(yǎng)基中的熒光素酶活性。當(dāng)該試劑與高斯熒光素酶相互作用時，產(chǎn)生發(fā)光產(chǎn)物，該發(fā)光產(chǎn)物提供強發(fā)光。

Amplite高斯熒光素酶報告基因測定試劑盒（AAT-12530）特點：

提供了與HTS液體處理儀器兼容的所有基本組件

它們具有高靈敏度，可以以方便的96孔和384孔微量滴定板形式進(jìn)行

半衰期為一小時的“輝光型”信號在大量檢測板之間提供一致的信號

與標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞生長培養(yǎng)基兼容

海腎熒光素酶

海腎螢光素酶是一種從海桑（Renilla reniformis）分離的36 kDa蛋白。與螢火蟲熒光素酶相比，海腎熒光素酶的底物和輔因子要求不同。海腎熒光素酶在氧氣存在下使用腔腸素，產(chǎn)生480 nm的藍(lán)光。與螢火蟲螢光素酶類似，海腎螢光素酶因其底物要求和光輸出方面的差異而可用于雙重報告檢測。

Amplite™海腎熒光素酶報告基因測定

Amplite™Renilla螢光素酶報告基因檢測試劑盒提供了一種快速，靈敏的方法，可以使用專有的發(fā)光配方在基于細(xì)胞的檢測中檢海腎螢光素酶的活性，與海腎螢光素酶相互作用后，該試劑產(chǎn)生具有強光的產(chǎn)物。

Amplite™海腎熒光素酶報告基因檢測試劑盒（12535）特點：

該測定法與標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞生長培養(yǎng)基兼容

該試劑盒可以測量野生型和合成hRluc基因的原始表達(dá)或基因表達(dá)

每個試劑盒均包含可以方便96孔和384孔板檢測所*的組分

圖3.用Amplite™Renilla熒光素酶報告基因檢測試劑盒在白色的96孔板中用NOVOstar酶標(biāo)儀（BMG Labtech）測量了Renilla熒光素酶。

各類螢光素酶底物，輔因子和物理特性：