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KSOM培養基各因素對小鼠植入前期胚體外生長的影響

時間:2021/6/15閱讀:323
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KSOM培養基(KSOM Medium)是一種小鼠胚胎培養液。KSOM培養基能夠讓受精卵克服雙細胞障礙,支持體外和體內發育。KSOM培養基能夠獲得更高的細胞分裂率,產生更多的囊胚發育。

 

KSOM培養基營養成分調整對小鼠植入前期胚體外發育的影響

KSOM+AA.jpg

目的囊胚發育率低和發育遲緩是繼"2-細胞阻滯"解決后小鼠胚胎體外培養中面臨的兩大問題。實驗通過對KSOM培養基營養成分的調整,觀察對胚胎發育的影響,優化培養基的構成。方法采用微滴培養法培養昆明小鼠單細胞胚胎,以胚胎發育到囊胚的比例、孵出比例以及注射hCG120 h囊胚全細胞數作為判斷培養效果的標準,比較KSOM在葡萄糖、牛血清白蛋白、氨基酸3種營養物質不同濃度下對小鼠植入前胚體外培養的效果。

 

結果在未加氨基酸時葡萄糖、牛血清白蛋白的變化對注射hCG后120 h囊胚形成率、囊胚全細胞數影響不大,添加氨基酸后,囊胚發育速度提高,部分孵出和全部孵出比例提高,囊胚全細胞數增大明顯,且葡萄糖、牛血清白蛋白與氨基酸對囊胚的發育有共同促進的作用。

 

結論通過添加適量的氨基酸、葡萄糖、BSA改良KSOM培養基能很好的促進小鼠植入前胚體外發育。

 

增加葡萄糖的影響

相關研究表明,在未加氨基酸時,單獨增加KSOM中葡萄糖和BSA濃度或同時增加二者濃度,對早期囊胚的形成率和囊胚卵裂球數無顯著影響,幾種情況下,KSOM與以往報道的培養基想必,均顯示了較高的囊胚形成率和囊胚卵裂球數。

 

增加BSA的影響

KSOM中BSA的濃度已經基本能滿足胚胎發育到早期囊胚的需求。

 

增加氨基酸的影響

KSOM中單獨添加氨基酸在囊胚發育的中后期顯示明顯的促進作用,部分孵出和*孵出的比例明顯提高,囊胚卵裂球數明顯增加,顯示了氨基酸在發育后期有BSA不可替代的加快生長和促進分化作用。

 

研究表明,通過增加KSOM培養基中葡萄糖和BSA濃度,同時添加一定濃度的Eagle必需氨基酸和非必需氨基酸,能很好的滿足小鼠植入前期胚體外生長、發育的需求。

 

美國Caisson Labs致力于生物技術和生命科學等行業領域,專注于植物生物學技術研究,以滿足全球不斷增長的食品,能源、醫藥日益增長的需求和發展。作為Caisson Labs的中國區域代理,艾美捷科技為中國客戶提供Caisson Labs制造的全系列產品,包括植物生物學產品(包括植物組織培養基、凝膠系列產品、植物生長調節劑、抗生素&抗菌劑、生化試劑以及植物組培容器和耗材)和動物以及微生物細胞培養產品。

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