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艾美捷T7 RNA聚合酶化學性質&文獻參考

時間:2022/11/8閱讀:281
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噬菌體T7 RNA聚合酶是一種DNA依賴性RNA多聚酶(99kDa),對含有T7噬菌體啟動子的DNA序列的體外RNA合成進行催化。高濃縮版T7 RNA聚合酶HC非常適合建立和優化高產量的體外轉錄反應。所提供的T7 IVT設置緩沖液、MgCl2DTT溶液能夠測試不同的反應條件,例如核苷酸/MgCl2濃度。

 

艾美捷T7 RNA聚合酶化學性質:

僅供體外使用!

運輸:凝膠包裝運輸

儲存條件:-20°C儲存

避免凍融循環

保質期:12個月

純度:≥ 95%SDS-PAGE

形式:液體

濃度:2.02.2μg/μlT7 RNA聚合酶HC儲存緩沖液中的A280?=140 l mmol-1 cm-1[1]

J小優化的分析設置建議:HighYield T7 RNA合成試劑盒(#RNT-101)。

活性:1μl T7 RNA聚合酶HC37°下10分鐘內產生>/=30μg RNA。這相當于1000 U NEBT7 RNA聚合酶(高濃度),#M0460T(活性測定條件:1x T7 IVT建立緩沖液,補充10 mM DTT12 mM MgCl23 mM NTPs1μl T7 RNA聚合酶HC1μg DNA模板(1.4 kpb RNA轉錄物),20μl。用熒光微板測定法測定RNA產量。)

 

艾美捷T7 RNA聚合酶包含

T7 RNA Polymerase HC

1x 50 μl (2 μg/μl)

50 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, 100 mM NaCl, 5 mM DTT, 0.1 % Triton-X-100, 50 % Glycerol (v/v), pH 8.0

T7 IVT Set-up Buffer

1x 200 μl (10x)

400 mM Tris-HCl (pH 8.0), 20 mM Spermidin

DTT

1x 100 μl (100 mM)

MgCl2

1x 200 μl (200 mM)

 

艾美捷T7 RNA聚合酶相關研究

HighYield T7 RNA Synthesis Kit, #RNT-101

RNAse Inhibitor - recombinant, #PCR-392

NTP bundle, #NU-1014

 

文獻參考

[1] King et al. (1986) Transcription by T7 RNA Polymerase Is Not Zinc-Dependent and Is Abolished on Amidomethylation of Cysteine-347. Biochemistry25(1):37.


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