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高效檢測——艾美捷PKA激酶活性檢測方案

時間:2023/2/3閱讀:208
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激酶背景:

1968年,化學家H. Fischer和Edwin G. Krebs發現了蛋白激酶A,更確切地說是腺苷3’, 5’-單磷酸(環AMP)依賴性蛋白激酶。他們因在磷酸化和去磷酸化以及它與蛋白激酶A活性的關系方面的工作而獲得了1992年的諾貝爾生理學或醫學獎。

 

PKA是研究得最-廣泛的蛋白激酶之一,部分原因在于它的獨-特性;在組成人類激酶組(kinome)的540個不同的蛋白激酶基因中,只有一個其他的蛋白激酶,酪蛋白激酶2,已知在生理條件下以四聚體形式的存在。

 

哺乳動物PKA亞基的多樣性是在Stan Knight博士和其他人鑒定出可能的四個C亞基基因和四個R亞基基因之后被意識到的。1991年,Susan Taylor等人結晶了PKA Cα亞基,首-次揭示了蛋白激酶核心的雙葉結構,為基因組中所有其它蛋白激酶(“激酶組")提供了藍圖。

 

已發現的蛋白激酶約有400多種,分子內都存在一個同源的由約270氨基酸殘基構成的催化結構區。在細胞信號傳導、細胞周期調控等系統中,蛋白激酶形成了縱橫交錯的網絡。這類酶催化從ATP轉移出磷酸并共價結合到特定蛋白質分子中某些絲氨酸、蘇氨酸或酪氨酸殘基的羥基上,從而改變蛋白質、酶的構象和活性。

 

艾美捷PKA激酶活性試劑盒(ADI-EKS-390A)是一種高效的檢測方法,使用很少的樣品量。該試劑盒使您能夠在方便的基于 96 孔板的檢測中讀取終點或動力學檢測,并提供簡單的樣品處理方案。該測定還提供高信噪比。

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圖:用EKS-390A分析純化的活性PKA活性。使用PKA基質微量滴定板測定不同數量的純化活性PKA。試驗在300℃下孵育60分鐘

 

PKA激酶活性試劑盒(ADI-EKS-390A)參數

替代名稱: 蛋白激酶A,cAMP依賴性蛋白激酶

應用: 比色檢測

活性測定

應用說明: 用于定量測定任何物種的部分純化、純化或粗酶制劑中的PKA激酶活性。

物種反應性: 物種獨立

使用/穩定性: 將所有組分儲存在 4°C,活性激酶在 -80°C 下儲存。

航運: 用干冰運輸

內容: 微量滴定板、抗體、偶聯物、抗體稀釋緩沖液、激酶測定稀釋緩沖液、ATP、活性激酶、洗滌緩沖液濃縮液、TMB 底物、終止液 2

 

PKA激酶活性試劑盒部分文獻:

神經炎癥介導的線粒體失調涉及術后認知功能障礙:Y.自由拉迪克。生物學 178, 134 (2022);

蛋白激酶C(PKC)-θ核易位的選擇性靶向可減少間充質基因特征并重振免疫治療耐藥性和轉移性癌癥中功能失調的CD8 + T細胞:J. Dunn等人;癌癥 14, 1596 (2022);

佛司可林通過TLR4作用在體外調節視網膜內皮細胞通透性:L. Liu, et al.;摩爾細胞。生化。476, 4487 (2021);

羅氟司特改善淀粉樣蛋白發生和taupath小鼠模型中的認知缺陷:參與一氧化氮狀態,Aβ擠出轉運蛋白ABCB1,以及PKA抑制劑H89逆轉:N.H. Ashour等人;神經精神藥理學。生物學精神病學111,110366(2021);

cAMP/PKA/CREB 通路和β-阻滯蛋白 1 在妊娠大鼠 LH 誘導黃體溶解中的作用:A. Vashishta等;復制 162, 21 (2021);


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