TopoGEN質粒轉染分析的HR DNA修復報告試劑盒，旨在讓研究人員研究他們選擇的細胞系中的同源重組（HR）。該試劑盒使用GFP作為HR途徑的體內讀數，并包括在您自己的實驗室中設置系統的適當控制。新：TopoGEN現在提供一種負擔得起的試驗規(guī)模（試劑盒中3個質粒各50ug），讓您測試新的基于細胞的試劑盒的功效。

艾美捷TopoGEN拓撲異構酶II條帶移位試劑盒：

產品型號：DR3050

類別：細胞環(huán)境DNA修復，移動瞬時檢測DNA修復系統

標簽：DNA修復，同源重組，HR DNA報告基因，質粒DNA

TopoGEN拓撲異構酶II條帶移位試劑盒詳情：

這是一個基于質粒轉染的報告系統，旨在允許客戶篩選或檢查影響同源重組（HR）DNA修復過程的任何因子。它將在大多數可以轉染的細胞系中工作。試劑盒使用GFP作為HR途徑的體內讀出。試劑盒包括兩個被驗證為高質量DNA的質粒（見圖1和圖2）：

• HR-GFP。當這個報告基因轉染到細胞中時，不會表達GFP，因為基因在雙盒結構中發(fā)生了突變。5'盒包含一個破壞性的I-Sce1位點/終止密碼子，而3'盒在同一區(qū)域是野生型，但包含阻止表達的缺失。

• I-Sce1表達質粒。這是一種巨型內切核酸酶，除了位于HR-GFP的5'盒中的單個I-Sce1位點外，不會在人類基因組的任何地方切割。

當這兩個質粒轉染到同一細胞時，將有一個%GFP讀數，反映HR修復的效率。由于試劑盒僅基于兩個DNA，可以實現合理的轉染效率，并且可以在幾乎所有“可轉染"的細胞系中檢查HR修復過程。轉染后，會產生一群GFP+細胞，可以進行分選或通過活細胞成像跟蹤。HR修復的效率與轉化為GFP+表型的細胞百分比相關。重要的是要在平行培養(yǎng)中包含帶有eGFP的轉染對照。eGFP對照基因可以單獨購買，不在試劑盒中。

誰應該購買這個試劑盒？

對篩選針對整個HR DNA修復途徑的因子、藥物、基因或基因產物感興趣的研發(fā)實驗室會發(fā)現這個試劑盒非常有用。DNA修復途徑充滿了可藥物化的目標，這一點已經得到了很好的證實。針對DNA修復的因子可能是很好的抗癌或抗病d藥物。此外，識別與DNA修復相互作用的其他基因和基因產物對于尋找新的藥物靶點也很重要。這個試劑盒的一個主要優(yōu)點是它在活細胞的環(huán)境中運行。這意味著結果將具有很高的生理相關性，因為事件在細胞內實時發(fā)生。此外，由于它基于熒光，可以利用單細胞成像跟蹤經歷修復的個體細胞，也可以使用時間推移成像跟蹤這些細胞的后代。這個試劑盒僅基于質粒報告基因，允許研究人員將系統放置在他們選擇的任何細胞系中。這在主要興趣是細胞系或譜系模型時提供了極大的靈活性。無需創(chuàng)建帶有整合報告基因的穩(wěn)定細胞系（這需要時間），為研究者提供了快速進入藥物測試或轉錄因子對HR的影響的途徑。

HR修復報告基因試劑盒包含在任何動物細胞系中創(chuàng)建完整的同源重組報告系統所需的試劑。

I-Sce1基因表達質粒，pSCE1（儲存于-20°C或4°C）。

DR-HRGFP（儲存于-20°C或4°C）。這個質粒含有一個普魯霉素選擇基因。

eGFP（帶有CMV啟動子的野生型GFP）轉染對照（儲存于-20°C或4°C）。

對于所有質粒，DNA濃度通常為0.5微克/微升（但需在管標簽上核實）。請注意，目錄編號表示試劑盒大小，這是基于DNA的量。

可選：為了幫助建立系統，我們提供含有單個GFP修復報告基因的對照HeLa細胞系（穩(wěn)定整合到基因組中），該細胞系在轉染I-Sce1質粒后將進行DNA修復（形成GFP+細胞）（請咨詢）。

試劑盒可能通過干冰或濕冰運輸，或者在某些情況下可能在常溫下運輸。所有試劑在收到后應儲存在4°C（短期）或-20°C（長期）。

艾美捷科技是TopoGEN的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質的產品與服務。