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巖藻糖Fucose--從結構到功能的多面性解析

時間:2025/1/21閱讀:263
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巖藻糖(fucose)是六碳糖的一種,又稱6- 脫氧- L- 半乳糖,并可以看做是一種甲基戊糖。自然界存在的巖藻糖絕大多數為L- 巖藻糖,D構型的巖藻糖僅作為稀有糖,發現于一些糖苷類化合物中。

 

L- 巖藻糖較大量地存在于海藻及樹膠中,也發現于某些細菌的多糖中。巖藻糖作為糖蛋白中糖鏈的組成部分,廣泛存在于各類細胞表面的質膜上。巖藻糖比一般六碳糖在第六碳原子上少一個羥基,所以巖藻糖比其他單糖親水性弱,而疏水性強一些。在某些血型物質分子中的巖藻糖是一定的血型的標記。

 

通常從海藻中提取巖藻糖,先用酸處理,中和后,以苯腙形式析出,除去苯肼,可得α-L- 巖藻糖結晶,熔點145℃。

 

艾美捷巖藻糖Fucose

貨號:AS07-268

免疫原:與N-糖鏈以α1,3鍵結合的核心巖藻糖殘基

宿主:兔

克隆性:多克隆

純度:免疫原親和純化的血清,溶于pH 7.4PBS

形式:凍干粉

數量:50 µg

復溶方法:復溶時加入50 µl無菌水

儲存條件:凍干粉/復溶后于-20°C保存;復溶后請分裝,避免反復凍融。打開管子前請短暫離心,以避免因材料粘附在蓋子或管壁上而導致的損失。

額外信息:α(1,3)巖藻糖不僅存在于植物中,也存在于某些無脊椎動物(如線蟲、蜜蜂等)中。然而,與這些生物的糖蛋白發生的交叉反應比在植物中觀察到的要弱。這種糖殘基在哺乳動物的內源性糖蛋白中不存在。

推薦稀釋度:0.5 µg/mlELISA)、1:40(免疫層析)、1 µg/10 mlWestern Blot

預期/表觀分子量:對于各種糖蛋白,分子量為10 - 100 kDa

已確認的反應性:高等植物、三角褐藻(Phaeodactylum tricornutum,一種硅藻)

預測的反應性:高等植物、三角褐藻

未反應的生物:目前尚未發現與預測反應性不符的已確認例外情況

額外信息:對照品:

蜂毒磷脂酶A2PLA2),僅含有α1.3巖藻糖,Sigma產品編號P9279

Ⅱ型辣根過氧化物酶,含有β1.2木糖和α1.3巖藻糖,Sigma產品編號P8250

該抗體不識別α1,6巖藻糖

 

應用實例:

11.png

左圖:擬南芥野生型的總細胞提取物(1)和巖藻糖基轉移酶缺陷的不同突變體的細胞提取物(2-5)(數據不是已出版)。一抗的使用濃度為10µg/10ml孵育緩沖液。使用增強化學發光(ECL)進行檢測。

右圖:抗巖藻糖和抗木糖抗體與各種對照的斑點印跡反應:AvidinFuc+/Xyl+)、胎球蛋白(Fuc-/Xyl-)、PLA2Fuc+/Xyl-)和Mur1-2Fuc-/Xyl+)。將2µl每種提取物點在硝化纖維膜上,放置在2WHATMAN過濾器(一個浸在TBS-T中)的頂部 在室溫下干燥1.5小時。用TBS-T中的2%低脂奶粉(0.1%吐溫20)封閉膜30分鐘,并用抗巖藻糖(1)(AS072681:1000)或抗木糖(2)(AS07 2671:100030分鐘,然后用二抗兔(1:1000)抗體(ALP 結合的推薦二抗AS09 607)。在反應展開之前,用TBS-T洗滌膜3 x 10分鐘,使用 堿性磷酸酶試劑BCIP®/NTB預混溶液(Sigma,編號B6404)。


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