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[干冰]抗泛素單克隆抗體(克隆VU-1),識別多泛素化和單泛素化蛋白

時間:2025/5/28閱讀:61
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泛素(Ub)是一種高度保守的8kDa多肽,存在于所有真核細胞中。它通過三種酶的順序作用與目標蛋白的賴氨酸殘基的ε-氨基結合,這三種酶分別是E1泛素激活酶、E2結合酶和E3連接酶。此外,泛素本身包含的七個賴氨酸殘基也可以作為泛素的受體,從而形成多泛素鏈。在這些連接方式中,K48K63連接方式已被充分研究。K48連接的多泛素化會靶向蛋白質進行蛋白酶體降解,而K63連接則調節信號事件、受體內吞和免疫反應。其他賴氨酸殘基上的多泛素連接則不太顯著,其生理功能仍大多未知。

 

LifeSensors開發了VU-1泛素單克隆抗體,能夠識別多泛素化和單泛素化蛋白以及游離泛素。VU-1已被證明可以識別K48K63K11連接以及線性泛素鏈;其他連接方式尚未經過測試。

 

艾美捷[干冰]抗泛素單克隆抗體(克隆VU-1)

貨號:VU-0101-0050  

應用:

Western blot1:1000)請參閱下方協議。  

ELISAIHC1:2001:500)  

所有應用的最佳條件應由最終用戶自行確定。  

來源:從雜交瘤上清液中純化。  

亞型:IgG1(小鼠源)  

純度:>90%  

克隆號:VU-1  

提供形式:0.5mg/mlPBS緩沖液,pH 7.2  

特異性:抗體能夠檢測被多泛素化和單泛素化修飾的蛋白、線性泛素鏈以及游離泛素。由于泛素在真核生物中高度保守,抗體的反應性與物種無關。  

規格:250ug,足以用于50次以上的Western blot實驗。  

儲存:-20℃保存。避免反復凍融。

 

[干冰]抗泛素單克隆抗體(克隆VU-1)圖片:

11.png

左圖:Western blot分析鏈特異性和細胞泛素化偶聯物,使用單克隆抗體VU-1。(AK48K63K11連接的多泛素化偶聯物;(B40µg HEK293T細胞裂解物(50nM硼替佐米處理);(COLN細胞未處理(對照)和1µM MG132處理。細胞裂解物經SDS-PAGE分離后,使用VU-1抗體(B.1µg/mlC.0.2µg/ml)進行免疫印跡。

右圖:VU-1單克隆抗體在ELISA中檢測未結合的泛素。未結合的泛素被涂覆在聚苯乙烯板上,封閉后與VU-1FK2抗體(1µg/ml)孵育,隨后加入抗小鼠HRP偶聯物(1:5000)。加入ECL后,使用Envision平板閱讀器讀取結果。

 

文獻參考:

1 Wilkinson, K.D., Regulation of ubiquitin-dependent processes by deubiquitinating enzymes. Faseb J, 1997. 11:1245-56.

2 Meulmeester E, et al Loss of HAUSP-mediated deubiquitination contributes to DNA damage-induced destabilization of Hdmx and Hdm2. Mol Cell.2005 18:565-76.

3 Faustrup H, et al. USP7 counteracts SCFbetaTrCP- but not APCCdh1-mediated proteolysis of Claspin. J Cell Biol. 2009 184:13-9.

4 Li M,et al. Deubiquitination of p53 by HAUSP is an important pathway for p53 stabilization Nature, 2002 416:648-53.

5.Seiberlich V. et.al. The small molecule inhibitor PR-619 of deubiquitinating enzymes affects the microtubule network and causes protein aggregate formation in neural cells: Implications for neurodegenerative diseases. Biochem et Biophys Acta, 2012, 1823;2057-2068.

 


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