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技術文章

種子生活力檢測試劑盒(溴麝香草酚藍BTB法)

閱讀:711          發布時間:2021-12-18

 種子生活力檢測試劑盒(溴麝香草酚藍BTB)

上海雅吉生物科技有限公司

一、產品簡介:

種子生活力是指種子能夠萌發的潛在能力或種胚具有的生命力,其高低決定了種子品質和實用價值大小,關系到播種時的用種量,測定種子生活力常用方法為發芽實驗法,即在適宜條件下讓種子吸水萌發,在規定天數內統計發芽的種子占供試種子數的百分比。但是常規發芽實驗法需時較長,無法用于應急需要,也無法檢測休眠種子的生活力。常用比較快速的檢測方法有氯化三苯基四氮唑(TTC)法、溴麝香草酚藍(BTB)法、紅墨水染色法和熒光法等。

具有生活力的種胚有呼吸作用,吸收空氣中氧氣放出二氧化碳,二氧化碳溶于水生成碳酸,又解離出氫離子和碳酸氫根,使得種胚周圍環境的酸度增加,因此可以用溴麝香草酚藍(BTB)來定性測定酸度的改變。BTB的變色范圍為PH6.0~7.6,在酸性介質中呈黃色,在堿性介質中呈藍色,中間色為綠色(變色點為7.1),因此可根據BTB顏色差異來判斷種子的生活力。本方法有以下優點:快速、準確;顏色變化明顯,易于觀察。

二、產品組成:

名稱規格

100ml

存儲

試劑(A)BTB指示劑

100ml

RT避光

試劑(B):瓊脂粉

1.5g

RT

使用說明書

一份

 三、自備材料:

1、材料:小麥、綠豆、水稻、油菜、花生、玉米等植物種子

2、恒溫箱

3、培養箱

4、培養皿

 四、操作步驟(僅供參考) 種子生活力檢測試劑盒(溴麝香草酚藍BTB)

1、浸種:將待測種子用30℃溫水浸泡2~6h,使種子充分吸脹。

2、配制BTB瓊脂凝膠:取適量的BTB指示劑和瓊脂粉,按BTB指示劑:瓊脂粉比例=10ml:0.15g的比例混合,用恒溫箱或微波爐加熱助溶,待瓊脂粉溶解后,趁熱倒在干凈的培養皿即為BTB瓊脂凝膠,厚度以能浸沒種子為宜,冷卻后備用。

3、隨機取100粒吸脹種子,種胚朝下,整齊地埋于BTB瓊脂凝膠中,間距至少1cm。

4、將培養皿置于30~35℃恒溫箱中培養1~4h。

5、在藍色背景下觀察,種胚附件呈現較深黃色暈圈的是活種子,否則是死種子。

6、可以用在沸水中浸泡處理的種子進行多種觀察。

 五、染色結果:

活種子

種胚附近呈深黃色

死種子

種胚附近無顏色變化

 六、計算:

觀察統計100粒種子,計算有活力種子的百分數。

其公式為:種子生活力百分數(%)=活種子粒數/100×100%

 七、注意事項:

1、BTB凝膠厚度取決于種子的大小,原則上需種胚接觸培養皿底部后尚有部分露出凝膠上方,凝膠厚度應使種子穩定其中。

2、種子需完好無損,不能有破種子或霉變種子。

3、BTB指示劑應為藍色溶液,如變黃色或綠色,說明pH降低,可滴加稀氨水或者氫氧化鈉等堿性試劑調整為藍色即可正常使用。

4、培養溫度一般以30~35℃為宜。

 八、有效期:12個月有效。

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  種子生活力檢測試劑盒(溴麝香草酚藍BTB)


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