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大鼠骨骼肌衛星細胞說明書

閱讀:253          發布時間:2018-9-12
提 供 商 上海雅吉生物科技有限公司 資料大小 105.7KB
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一、產品簡介

大鼠骨骼肌衛星細胞說明書

1、產品名稱:大鼠骨骼肌衛星細胞

2、組織來源:大鼠骨骼肌

3、產品規格:5×105 細胞/25cm2 培養瓶

4、細胞簡介: 骨骼肌衛星細胞指骨骼肌中除骨骼肌纖維(肌細胞)外的一種扁平、有突起的細胞。其

附著于肌纖維

(肌細胞)表面;當肌纖維(肌細胞)受損后,肌衛星細胞可增殖分化,參與肌纖維(肌細胞)的修復,

因此具有干細胞性質。

本公司生產的大鼠骨骼肌衛星細胞采用酶解法制備而來,細胞總量約為5×105/T25 方瓶,細胞純度可

90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養基信息:

我們推薦使用大鼠骨骼肌衛星細胞*培養液(產品編號:KR5083-5)作為體外培養大鼠骨骼肌衛星

細胞的培養基。

二、使用方法

1、您收到細胞后,請按照以下方法進行操作:

取出T-25cm2培養瓶,75%酒精擦拭培養瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2 細胞培養箱中靜置4-6

小時或過夜,以穩定細胞狀態,然后換用新鮮*培養液繼續培養或進行傳代。

2、細胞傳代:

1)細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時,棄25cm2 培養瓶中的培養液,用PBS 清洗細胞一次;

2)添加0.125%胰蛋白酶消化液約2ml 至培養瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入*

培養液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至15ml 離心管中,1500rpm/min,離心

5min

3)棄上清,沉淀細胞用12ml *培養基重懸,然后按1:2 比例進行分瓶傳代,后放入37℃,

5%CO2 胞培養箱中培養;

4)待細胞*貼壁后,觀察培養結果,之后進行換液培養或傳代。

3、細胞凍存:

1)細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時,棄25cm2 培養瓶中的培養液,用PBS 清洗細胞一次;

2)添加0.125%胰蛋白酶消化液約2ml 至培養瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后輕輕吹打

細胞使之脫落,再加入*培養液終止消化,然后將懸液轉移至15ml 離心管中,1500rpm/min,離心

5min

3)用適當量的凍存液(基礎培養基:FBSDMSO=7:2:1)重懸細胞,并放置于凍存管中;

4)先將細胞凍存管放置于-201.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h 后轉入液氮中進行長期保存。

4、細胞復蘇:

1)從液氮中取出細胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存

管中無結晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;

2)將凍存管中的細胞移至15ml 無菌離心管中,滴加入*培養液5ml 混勻細胞,然后將細胞懸液轉

移至適當面積大小的培養皿中;

3)放置于375%CO2 細胞培養箱中培養;

4)第二天,換用新鮮*培養基繼續培養。

三、注意事項

1、培養基于4條件下可保存3-6 個月;

2、在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作;

3、該細胞只可用于科研;

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