化工儀器網(wǎng)
資料下載
熒光法測定DNA濃度
閱讀：1485 發(fā)布時間：2018-9-19這種染料使用僅結(jié)合雙鏈DNA的熒光染料來測量DNA濃度。當(dāng)與DNA結(jié)合時，這種染料的熒光被大大放大。
1。打開信標(biāo)2000儀器，讓它預(yù)熱30分鐘至1小時，然后采取任何測量。
2。為了生成標(biāo)準(zhǔn)曲線，將下列量的DNA分為Eppnordf管：
30納克，20納克，10納克，5納克，2.5納克，1納克，0.5納克。還需要2個沒有DNA的管。一個管將接收染料，另一個將不接收染料（空白）。
DNA可以在TE中稀釋，但添加到試管中的大體積應(yīng)為5微升或更少。
三。在標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi)（優(yōu)選在該范圍的中點）的未知DNA對管的等量。
4。向每個試管中加入200微升PanVera DNA分析緩沖液并充分混合（重要：DNA分析緩沖液必須使用，H20或其他緩沖液不能工作）。
5。在信標(biāo)2000中準(zhǔn)備和標(biāo)記用于熒光測量的玻璃管。
6。添加6微升PANVRA DNA檢測染料到每個反應(yīng)和渦流（染料可以添加到所有的管，然后所有樣品讀取；在染料添加10分鐘內(nèi)，值沒有顯著改變）。
7。在染料加入10分鐘內(nèi)測定總強(qiáng)度值。使用程序γ3（靜態(tài)測量用23度的單個空白值）。
8。標(biāo)準(zhǔn)曲線應(yīng)該是線性的。從標(biāo)準(zhǔn)曲線中確定未知的DNA濃度。