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海腎螢光素酶基因檢測試劑盒

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更新時間:2024-10-20 15:56:34瀏覽次數:605

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 100次
貨號 RG016    
海腎螢光素酶基因檢測試劑盒是一種以腸腔素(Coelenterazine)為底物來檢測海腎螢光素酶(Renilla reniformis luciferase,簡稱renilla luciferase)活性的試劑盒。

詳細介紹

  上海雅吉的海腎螢光素酶基因檢測試劑盒(Renilla Luciferase Reporter Gene Assay Kit),是一種以腸腔素(Coelenterazine)為底物來檢測海腎螢光素酶(Renilla reniformis luciferase,簡稱renilla luciferase)活性的試劑盒。
      海腎螢光素酶是一種分子量約為36kD的蛋白,在氧氣存在的條件下,可以催化Coelenterazine氧化成Coelenteramide。在Coelenterazine氧化的過程中,會發出生物螢光(bioluminescence)。生物螢光可以通過化學發光儀(luminometer)或液閃測定儀進行測定。本試劑盒的檢測原理參考圖1。

通過螢光素和螢光素酶這一生物發光體系,可以非常靈敏、高效地檢測基因的表達。通常把感興趣基因的轉錄調控元件或
5’啟動子區克隆在luciferase的上游,或把3’-UTR區克隆在luciferase的下游等,構建成報告基因(reporter gene)質粒。然后轉染細胞,用適當藥物等處理細胞后裂解細胞,測定螢光素酶活性。通過螢光素酶活性的高低來判斷藥物處理等對目的基因的轉錄調控作用。海腎螢光素酶一方面常用作螢火蟲螢光素酶報告基因檢測的內參,以消除由于質粒的轉染效率不同而帶來的誤差;另一方面海腎螢光素酶也可以和螢火蟲螢光素酶一樣被用于常規的報告基因檢測。
      海腎螢光素酶基因檢測試劑盒海腎螢光素酶催化Coelenterazine發光的zui強發光波長為465nm (centered around 465nm)。
      本試劑盒可以測定100個樣品。
包裝清單:
產品編號    產品名稱    包裝
RG016-1    海腎螢光素酶報告基因細胞裂解液    60ml
RG016-2    海腎螢光素酶檢測緩沖液    10ml
RG016-3    海腎螢光素酶檢測底物(100X)    100μl
—    說明書    1份
保存條件:
      海腎螢光素酶報告基因細胞裂解液和海腎螢光素酶檢測緩沖液,4℃保存3個月有效,-20℃保存一年有效;海腎螢光素酶檢測底物(100×),-20℃避光保存6個月有效,-80℃避光保存一年有效。
注意事項:
      為取得*測定效果,在用單管的化學發光儀測定時,樣品和測定試劑混合后到測定前的時間應盡量控制在相同時間內,例如30秒內;使用具有化學發光測定功能的多功能熒光酶標儀時,宜先把樣品全部加好,然后統一加入海腎螢光素酶檢測工作液。
      由于溫度對酶反應有影響,所以測定時樣品和試劑均需達到室溫后再進行測定。
      樣品和測定試劑混合后,必須等待1-2秒,再進行測定。測定時間通常為10秒,根據情況也可以測定更長或更短時間,但是同一批樣品宜使用相同的測定時間。
      海腎螢光素酶檢測底物(100×)配制在無水乙醇中。由于無水乙醇容易揮發,有時會在初次使用時發現體積明顯小于100μl的情況,此時用無水乙醇把體積補足至100μl,并混勻后即可使用。
      海腎螢光素酶檢測工作液宜配制后立即使用。如不能立即使用,-20℃可以保存一周。隨著保存時間的延長檢測效果會不斷下降,因此不可配制成工作液后長期保存。
      為避免由于質粒轉染細胞時效率的差異而帶來的誤差,可以同時轉入適當的螢火蟲螢光素酶(firefly luciferase)的報告基因質粒作為內參,采用碧云天的雙螢光素酶報告基因檢測試劑盒(RG016/RG017)進行檢測;也可以同時轉入β-半乳糖苷酶(β-galactosidase, β-gal)報告基因質粒作為內參,然后采用碧云天生產的β-半乳糖苷酶報告基因檢測試劑盒(RG0036)進行檢測。采用本試劑盒中的報告基因細胞裂解液裂解獲得的樣品可以直接用于β-半乳糖苷酶報告基因檢測試劑盒(RG0036)的檢測。
      僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。
      為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。 

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